[发明专利]一种核酸的转座酶打断一站式处理方法及试剂

权利要求书

1.一种核酸的转座酶打断一站式处理方法，包括如下步骤：

使用转座酶包埋复合体对核酸进行随机打断，其中所述转座酶包埋复合体包含转座酶和含转座酶识别序列的第一接头；

加入第一试剂进行处理，打破所述转座酶与所述核酸的靶序列的吸附作用；

加入第二试剂进行处理，减弱所述第一试剂对后续酶促反应的影响；

以所述第二试剂处理后的产物为模板成分进行PCR反应，得到打断的核酸片段两端连接有接头的PCR产物；

其中所述第一试剂包含SDS溶液；

其中所述第二试剂包含Triton-X100溶液，并且还包含吐温-20溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在加入第二试剂进行处理之后并且在进行PCR反应之前还包括：通过连接酶在缺口处连接上第二接头，其中所述缺口是在打断的核酸两端连接所述第一接头后形成的9bp碱基缺失。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述第二接头的3’端为双脱氧核苷酸，以防止所述第二接头与所述第一接头互连。

4.一种核酸的转座酶打断一站式处理试剂，包括如下组成部分：

第一试剂，包含SDS溶液，用于打破所述转座酶与所述核酸的靶序列的吸附作用；

第二试剂，包含Triton-X100溶液和吐温-20溶液，用于减弱所述第一试剂对后续酶促反应的影响；

还包括：

转座酶和含转座酶识别序列的第一接头，用于形成转座酶包埋复合体以对核酸进行随机打断；

还包括：

PCR组分，用于以所述第二试剂处理后的产物为模板成分进行PCR反应。

5.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于，所述试剂还包括：

第二接头组分，用于连入打断的核酸两端连接所述第一接头后形成的缺口处：

连接酶组分，用于在打断的核酸两端连接所述第一接头后形成的缺口处连接上第二接头。