[发明专利]多亚基结构的亚基的结合结构域用于将药物活性实体靶向递送至多亚基结构的用途

说明书

技术领域

本文记载了一种通过使用多亚基结构的亚基的结合结构域作为靶向和 有效载荷递送实体，将药物活性实体直接靶向递送至多亚基结构上其作用 位点的方法。

发明背景

在WO2002/24219中，记载了一种分离的蛋白质复合物，其包括生长 因子、生长因子结合蛋白和玻连蛋白。还记载了通过给药所述蛋白质复合 物来调节细胞增殖和/或迁移的方法，用于伤口愈合、皮肤修复和组织替代 治疗的目的。

在WO2009/033095中，记载了人源化抗-PAI-1抗体及其抗原结合片段 的组合物，其将PAI-1转换成其潜伏形式。记载的另一个方面涉及通过将 PAI-1转换成其潜伏形式或提高蛋白水解断裂而结合和中和PAI-1的抗体。 记载的另一个方面涉及抑制或中和PAI-1的人源化抗体的用途，其用于与 PAI-1相关的疾病或病症的检测、诊断或治疗，或其组合。

在WO2009/131850中，记载了一种用于治疗患者青光眼或升高的IOP 的方法，包括将有效量的包含抑制PAI-1表达或PAI-1活性的药剂的组合 物给药于患者。

即使不是全部，也有许多靶向递送方法具有物种限制的缺陷，即，例 如，对于实验动物中的替代物研究，很难获知物种交叉反应方法。

即使不是全部，也有许多用于靶向递送的方法是特定靶标特异性的。

在WO2009/089059中，记载了PAI-1功能的治疗性抑制剂及其使用方 法。WO2012/085076记载了uPAR-拮抗剂及其用途。在WO2012/035034 中，记载了包含丝氨酸蛋白酶抑制蛋白-指多肽和第二个肽、多肽或蛋白质 的融合多肽，以及所述多肽的用途。

发明概述

已经发现，多亚基结构(例如，多亚基蛋白质)的亚基的结合结构域 可以用于将治疗活性实体(例如，抑制性多肽)靶向递送至多亚基结构。

已经发现，源自多亚基结构的亚基的结合结构域的特异性结合相互作 用可以用于靶向递送已经与结合结构域缀合的治疗活性实体。

本文中记载的用途和方法是基于对多亚基结构的单个亚基之间存在的 特异性结合相互作用(尤其是其特异性的识别特征)的利用。尽管可以将 治疗活性实体与全尺寸亚基缀合，但有利的是减小缀合物的大小，以允许 重组生产和以可接受的剂量施用。因此，优选只使用亚基的结合结构域， 用于正确识别并靶向多亚基结构的其他亚基。

本文中记载的一个方面是，多亚基结构的亚基的结合结构域与(正好) 一个生物活性实体的缀合物用于将生物活性实体靶向递送至多亚基结构 的用途。

在一个实施方案中，亚基的结合结构域可以可逆地与多亚基结构结合 和自多亚基结构解离。

在一个实施方案中，结合结构域所来自的亚基是多亚基结构的第二大 亚基或多亚基结构的最小亚基。

在一个实施方案中，多亚基结构是二亚基结构或三亚基结构或四亚基 结构。

在一个实施方案中，多亚基结构是多亚基蛋白质，其中至少所述亚基 或全部单独亚基彼此非共价地结合。

在一个实施方案中，生物活性实体是药物活性实体。在一个实施方案 中，生物活性实体是治疗活性多肽。

在一个实施方案中，缀合物是重组缀合物。

在一个实施方案中，缀合物进一步包括半衰期延长实体。在一个实施 方案中，半衰期延长实体选自聚(乙二醇)、人血清白蛋白或其片段和抗体 Fc-区。

在一个实施方案中，结合结构域和治疗活性多肽和半衰期延长实体彼 此独立地直接缀合或通过肽接头彼此缀合。

已经发现，在本文中记载的缀合物中，单一一个生物活性实体的效力 足以诱导PAI-1的潜伏。

在一个实施方案中，缀合物在N-末端至C-末端方向中包括生物活性实 体和多亚基结构的亚基的结合结构域。

在一个实施方案中，缀合物进一步包括抗体Fc-区。在一个实施方案中， 抗体Fc-区在缀合物的C-末端。