[发明专利]利用溶血磷脂酰胆碱支架的组合物和方法

权利要求书

1.一种筛选一种或多种脂肪酸以确定所述一种或多种脂肪酸经由Mfsd2a蛋白的转运的方法，其中所述一种或多种脂肪酸与LPC缀合以经由Mfsd2a蛋白转运，所述方法包括：

(a) 使包含所述一种或多种脂肪酸的生物混合物接触经基因修饰的KO小鼠和野生型小鼠，所述KO小鼠的基因组中包含所述Mfsd2a基因的纯合破坏；

(b) 测定所述KO小鼠和所述野生型小鼠的组织或流体中所述一种或多种脂肪酸的量；以及

(c) 比较所述KO小鼠和所述野生型小鼠的所述组织或流体中所述一种或多种脂肪酸的量，其中与所述KO小鼠相比，所述野生型小鼠中所述一种或多种脂肪酸的量较高是经由Mfsd2a蛋白转运所述脂肪酸的指示，其中所述组织或流体是脑。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物混合物来源于乳、鱼油提取物或LPC制剂。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述接触方法是经口或经静脉内施用。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种脂肪酸是营养补充剂。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述营养补充剂是LPC制剂。

6.一种筛选一种或多种脂肪酸以确定一种或多种脂肪酸经由Mfsd2a蛋白的转运的体外方法，其中所述一种或多种脂肪酸与LPC缀合以经由Mfsd2a蛋白转运，所述方法包括：

(a) 使包含所述一种或多种脂肪酸的生物混合物接触包含人野生型Mfsd2a cDNA的细胞或包含突变型人Mfsd2a cDNA的细胞或mock转染的细胞；

(b) 测定包含所述人野生型Mfsd2a cDNA的细胞和包含突变型人Mfsd2a cDNA的细胞或mock转染的细胞中所述一种或多种脂肪酸的量；以及

(c) 比较所述包含野生型Mfsd2a cDNA的细胞和包含突变型人Mfsd2a cDNA的细胞或mock转染的细胞中所述一种或多种脂肪酸的量，其中与包含突变型人Mfsd2a cDNA的细胞或mock转染的细胞相比，所述包含野生型Mfsd2a cDNA的细胞中所述一种或多种脂肪酸的量较高是所述脂肪酸经由Mfsd2a蛋白转运的指示。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述细胞是HEK 293。

8.根据权利要求6所述的方法，其中所述突变型人Mfsd2a cDNA包含所述人Mfsd2a蛋白序列中D93或D97对应的位置处的突变。

9.一种筛选调节通过Mfsd2a蛋白的转运的化合物的体外方法，所述方法包括：

(a) 使包含人野生型Mfsd2a cDNA或突变型人Mfsd2a cDNA的细胞或mock转染的细胞接触LPC-棕榈酸、LPC-油酸、LPC-硬脂酸、LPC-亚油酸、LPC-亚麻酸、LPC-花生四烯酸或LPC-二十二碳六烯酸；

(b) 测定在包含所述人野生型Mfsd2a cDNA的所述细胞和所述包含突变型人Mfsd2acDNA的细胞或mock转染的细胞中在存在和不存在测试化合物的情况下，所述LPC-棕榈酸、LPC-油酸、LPC-硬脂酸、LPC-亚油酸、LPC-亚麻酸、LPC-花生四烯酸或LPC-二十二碳六烯酸的摄入量；

其中与不存在所述测试化合物的情况相比，在存在所述测试化合物的情况下，包含所述人野生型Mfsd2a cDNA的细胞摄入LPC-棕榈酸、LPC-油酸、LPC-硬脂酸、LPC-亚油酸、LPC-亚麻酸、LPC-花生四烯酸或LPC-二十二碳六烯酸的水平增加或减少，可将所述化合物鉴别为通过所述Mfsd2a蛋白的转运的调节物。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述细胞是HEK 293。

11.根据权利要求9所述的方法，其中所述突变型人Mfsd2a cDNA包含所述人Mfsd2a蛋白序列中D93或D97对应的位置处的突变。