[发明专利]引起增强的转录的终止子序列的分离

权利要求书

1.重组表达构建体，其包含含有SEQIDNO:1或SEQIDNO:2中的 至少一个或其互补序列或反向互补序列的终止子分子，其中所述的终止子 分子引起与所述终止子分子功能连接的一个或更多个异源核酸分子的增 强的表达。

2.重组表达构建体，其包含终止子分子，所述终止子分子包含选自由 下列组成的组的核酸序列:

a)包含SEQIDNO:1或SEQIDNO:2的序列的核酸分子；

b)包含与SEQIDNO:1或SEQIDNO:2具有至少80％序列同一性 的序列的核酸分子；

c)a)或b)的核酸分子的100或更多个连续的碱基的片段，该片段具有 具SEQIDNO:1或SEQIDNO:2的序列的相应核酸分子的表达增强活 性；

d)核酸分子，它是a)或b)的核酸分子的互补序列或反向互补序列；

e)由100个或更多个核苷酸组成的核酸分子,它在等同于在50℃下在 7％十二烷基硫酸钠(SDS)中杂交并且在50℃下在2XSSC、0.1％SDS中 洗涤一次或更多次的条件下，与包含SEQIDNO:1或SEQIDNO:2或其 互补序列的增强转录的终止子的至少50个连续核苷酸的核酸分子的互补 序列杂交；

其中所述的终止子分子引起与所述的终止子分子功能连接的一个或 更多个异源核酸分子的增强的表达。

3.用于鉴定和分离引起异源核酸分子的增强的表达的终止子分子的 方法，所述的终止子分子与所述的异源核酸分子在表达构建体内在功能上 连接,所述方法包括

a)鉴定3′非翻译区；

b)鉴定相应的基因组DNA；

c)从b)中鉴定出的组中鉴定一种分子，该分子

i)包含100个或更多个连续的碱基的片段，该片段拥有具有SEQID NO:1或SEQIDNO:2的序列的相应核酸分子的表达增强活性的65％或 更大；并且

ii)包含一种序列，该序列

1)与SEQIDNO:1或SEQIDNO:2具有至少80％的序列同一 性,或

2)在等同于在50℃下在7％十二烷基硫酸钠(SDS)中杂交并且 在50℃下在2XSSC、0.1％SDS中洗涤一次或更多次的杂交条件下,与 SEQIDNO:1或SEQIDNO:2的互补序列杂交；和

d)从b)或c)中分离至少100bp的基因组DNA。

4.用于生产表达构建体的方法,当在植物细胞或植物或其部分中被表 达时，该构建体与相应的对照植物或其部分相比，增强一种或更多种核酸 分子的表达,所述方法包括:

a)引入终止子分子，其包括一个或更多个在权利要求2a)至e)中所定义 的终止子分子；

和

b)使所述的一个或更多个终止子分子与启动子和处于所述启动子的控 制下的核酸分子在功能上连接,其中所述的终止子分子异源于所述的核酸 分子和/或启动子。

5.用于生产植物细胞、植物或其部分的方法，该植物细胞、植物或其 部分与相应的对照植物或其部分相比，具有一种或更多种核酸分子的增强 的表达,所述方法包括:

a)把包含在权利要求2a)至e)中所定义的终止子分子的一个或更多个 终止子分子引入植物细胞、植物或其部分中；

b)把所述的一个或更多个终止子整合到所述的植物细胞、植物或其部 分的基因组中,从而所述的一个或更多个终止子与异源于所述的一个或更 多个终止子的内源性核酸在功能上连接；以及任选地

c)从所述转化的细胞中再生包含所述的一个或更多个终止子的植物或 其部分。