[发明专利]使用环保洗涤剂的病毒灭活方法

说明书

本发明提供在治疗性多肽的制备工艺中使用环境相容的洗涤剂灭活产品原料流中病毒的方法。环境相容的洗涤剂在有效地灭活原料流中的病毒的同时对产品质量不产生不利影响。

相关申请的交叉引用

本申请要求2013年11月15日提交的美国临时专利申请号61/905,075，以及2014年2月7日提交的美国临时专利申请号61/937,284的优先权，其内容在此整体引入作为参考。

技术领域

本发明提供使用洗涤剂的病毒灭活方法。

背景技术

出于各种目的，药物活性物质的生物技术生产需要辅助物质。洗涤剂用于合成阶段结束时，来裂解生产细胞、释放合成产品进行纯化，并提供抗病毒或细菌污染的保护作用。所需的产品纯化后，生长介质和用于产品纯化的缓冲液会被灭活，并排至废水。按照环境风险评价(ERA)针对洗涤剂作出的评估，这种排放可能造成环境问题。

当前在药物活性物质的生物技术生产中用于灭活病毒的方案常依赖于使用Triton X-100。Triton X-100的降解产品是辛基酚(octlyphenol)，一种证明有雌激素作用的生态毒素(ecotoxin)。对辛基酚排放规定的限值是0.01～0.1ppb。这样，在生物技术工艺中使用Triton-X可能需要使用复杂和昂贵的手段，以从废物流中除去辛基酚。在生物制剂的生产中需要使用环境相容的洗涤剂。

本文引用的所有参考文献，包括专利申请和出版物，通过引用将其全文并入。

发明内容

本发明提供在治疗性多肽的制备工艺中灭活产品原料流(feedstream)中病毒的方法，该方法包括用洗涤剂处理原料流的步骤，其中所述洗涤剂是与环境相容的。该方法保持了治疗性多肽的产品质量；例如，与使用Triton X-100的方法或无洗涤剂的方法相比较而言。

在一些实施方案中，治疗性多肽的产品质量导致产品变体(variant)的改变不超过产品原料流中总多肽的5％。在一些实施方案中，产品变体的增加不超过产品原料流中总多肽的5％。在一些实施方案中，产品变体是尺寸变体、电荷变体、氧化变体、脱酰胺变体、糖化变体或具有改变的聚糖分布(glycan profiles)的变体。在一些实施方案中，产品变体是酸性和/或碱性产品变体。在本发明的一些实施方案中，洗涤剂处理原料流不造成多肽的片断化增加超过约5％。在一些实施方案中，洗涤剂处理原料流不造成原料流中聚集体的增加超过约5％。在其它实施方案中，洗涤剂处理原料流不导致制备工艺中多肽的产量降低超过约5％。

本发明提供在治疗性多肽的制备工艺中灭活产品原料流中病毒的方法，该方法包括用洗涤剂处理原料流的步骤，其中将环境相容的洗涤剂加入原料流至最终浓度约0.01％至约10％。在一些实施方案中，洗涤剂加入原料流至最终浓度约0.3％至约1％。在一些实施方案中，原料流经洗涤剂处理至少约1分钟到至少约48小时。在其它实施方案中，原料流经洗涤剂处理至少约15分钟到至少约3小时。在其它实施方案中，原料流经洗涤剂处理至少约1小时。在本发明的一些实施方案中，原料流在约4℃到约30℃接受洗涤剂处理。在其它实施方案中，原料流在约15℃到约20℃接受洗涤剂处理。

在本发明的一些实施方案中，洗涤剂是非离子洗涤剂或两性离子洗涤剂。在一些实施方案中，洗涤剂具有约12至约15的亲水亲油平衡值(HLB)。

在本发明的一些实施方案中，洗涤剂不包含或形成辛基酚。在一些实施方案中，洗涤剂不包含或形成过氧化物。

在本发明的一些实施方案中，包含洗涤剂的原料流是低浊度的。在一些实施方案中，向原料流添加洗涤剂不增加原料流的浊度。

在本发明的一些实施方案中，丢弃时，由洗涤剂使用导致的受纳水体中洗涤剂的预测环境浓度(PEC)在该洗涤剂的预测无效应浓度(PNEC)以下。在其它实施方案中，PEC比PNEC低。