[发明专利]抗原受体的筛选测试

权利要求书

1.一种用于识别特异性地结合所关注的抗原的抗原受体的方法，该方 法包括：

(a)将多个表达抗原受体的细胞与抗原结合；

(b)在所述的抗原存在和缺乏下，在所述的表达抗原受体的细胞的 表面上测量激活的粘附分子的量；以及

(c)由多个所述的表达抗原受体的细胞识别特异性地结合所述的抗原 的所述的表达抗原受体的细胞，其中在所述的抗原存在下，在所述的表达 抗原受体的细胞的表面上，激活的粘附分子的量相对于合适的对照增多， 表明所述的抗原与所述的表达抗原受体的细胞结合，由此识别特异性地结 合所述的所关注的抗原的抗原受体。

2.权利要求1所述的方法，其进一步包括无性分离在所述的步骤(c) 中识别的所述的表达抗原受体的细胞。

3.权利要求1所述的方法，其进一步包括测定在所述的步骤(c)中 识别的所述的抗原受体的至少一部分的核酸或氨基酸序列。

4.上述权利要求的任意一项所述的方法，其中所述的粘附分子为整合 素。

5.权利要求4所述的方法，其中所述的整合素为白细胞功能抗原1 (LFA-1)或VeryLate抗原4(VLA-4)分子。

6.上述权利要求的任意一项所述的方法，其中通过测量所述的表达抗 原受体的细胞与细胞外基质蛋白质或抗体的结合来测量所述的激活的粘 附分子的量，其中所述的细胞外基质蛋白质或抗体与所述的激活的粘附分 子结合但是不能与静止的粘附分子结合。

7.权利要求5所述的方法，其中所述的细胞外基质蛋白质为细胞间粘 附分子1(ICAM-1)或纤连蛋白分子。

8.权利要求6或7所述的方法，其中使用涂敷所述的细胞外基质蛋白 质或所述的抗体的无标记生物传感器来测量所述的表达抗原受体的细胞 与所述的细胞外机制蛋白质或所述的抗体的结合。

9.权利要求8所述的方法，其中所述的生物传感器为比色共振反射光 学生物传感器。

10.上述权利要求的任意一项所述的方法，其中所述的抗原受体为B 细胞受体。

11.权利要求10所述的方法，其中所述的B细胞受体为人类B细胞 受体。

12.上述权利要求的任意一项所述的方法，其中所述的表达抗原受体 的细胞为B细胞或杂交瘤细胞。

13.权利要求12所述的方法，其中所述的B细胞是由一种或多种天然 动物分离的。

14.权利要求12所述的方法，其中所述的B细胞是由一种或多种天然 动物分离的，其中所述的动物未使用所述的所关注的抗原进行免疫攻击。

15.权利要求13或14所述的方法，其中所述的动物为人类。

16.权利要求12所述的方法，其中所述的B细胞经过永生化。

17.权利要求12所述的方法，其中所述的B细胞表达内源抗体。

18.权利要求12所述的方法，其中所述的B细胞表达异源抗体的文库。

19.权利要求18所述的方法，其中所述的文库包含独特的抗体的天然 谱系。

20.权利要求19所述的方法，其中所述的文库为天然抗体的文库。

21.权利要求18所述的方法，其中所述的文库包含人类抗体。

22.权利要求18所述的方法，其中所述的文库包含多个独特的合成的 抗原受体。

23.权利要求12所述的方法，其中所述的B细胞表达独特的嵌合抗原 受体的文库，其中各个嵌合受体包含与异源结合分子连接的抗原受体的一 部分。