[发明专利]高表达发酵单胞菌启动子

权利要求书

1.一种合成的核酸分子，所述合成的核酸分子包含具有在天然运动发酵 单胞菌(Z.mobilis)甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因启动子的位置90处T对 C的碱基取代的运动发酵单胞菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因启动子，所 述天然运动发酵单胞菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因启动子的序列示于 SEQID1中。

2.一种合成的核酸分子，所述合成的核酸分子包含选自SEQIDNO：2、 4、6和7的运动发酵单胞菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因启动子序列。

3.一种嵌合基因，所述嵌合基因包含可操作地连接至异源核酸分子的权 利要求1或2所述的合成的核酸分子。

4.根据权利要求3所述的嵌合基因，其中所述异源核酸分子编码蛋白质或 肽。

5.根据权利要求3所述的嵌合基因，其中所述异源核酸分子编码选自反义 RNA、核糖酶和干扰RNA的调控RNA分子。

6.一种载体，所述载体包含权利要求1或2所述的合成的核酸分子。

7.一种转化细菌细胞的方法，所述细菌细胞选自发酵单胞菌 (Zymomonas)细胞和发酵杆菌(Zymobacter)细胞，所述方法包括 将权利要求1或2所述的合成的核酸分子引入到所述细胞中。

8.根据权利要求7所述的方法，其中引入包括将权利要求1或2所述的合 成的核酸分子整合到所述细胞的基因组中或者保持在所述细胞内稳定 复制的质粒上。

9.一种重组细菌菌株，所述重组细菌菌株包含权利要求1或2所述的合成 的核酸，其中所述细菌菌株选自发酵单胞菌和发酵杆菌。

10.根据权利要求9所述的重组细菌菌株，其中所述分离的核酸分子为嵌 合基因的启动子。

11.根据权利要求10所述的重组细菌菌株，其中所述嵌合基因包含分离的 核酸分子，所述分离的核酸分子编码选自下列的酶：木糖异构酶、木 酮糖激酶、转酮醇酶、转醛醇酶、L-阿拉伯糖异构酶、L-核酮糖激 酶、L-核酮糖-5-磷酸-4-差向异构酶、核糖-5-磷酸异构酶和核酮糖-磷 酸-3-差向异构酶。

12.一种用于生产改善的合成甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因启动子的方法，所 述方法包括：

a)从来自发酵单胞菌和发酵杆菌的甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因分离包含 甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因启动子区域的核酸片段；以及

b)将在位置90处T对C的碱基取代引入到a)的分离的片段中，从 而产生改善的合成甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因启动子。

13.一种由权利要求12所述的方法制备的改善的合成甘油醛-3-磷酸脱氢 酶基因启动子。