[发明专利]诊断结核病的方法

权利要求书

1.一种通过检测指示活动性结核病的替代标记物抗体诊断结核病的方 法，所述方法包括步骤：

取出结核分枝杆菌来源的分离的分枝菌酸抗原或其合成的类似物在脂质 体载体中制备含分枝菌酸抗原的脂质体；

在电极上固定所述结核分枝杆菌来源的分离的分枝菌酸抗原或其合成的 类似物，以在所述电极上制备结核分枝杆菌来源的固定抗原；

从疑似患有活动性结核病的人类或动物中获得诊断样品，所述诊断样品 可能含有针对所述固定抗原的替代标记物抗体；

稀释部分或全部所述诊断样品，并将所述稀释的样品的部分或全部分为 第一样品和第二样品；

通过用氧化还原探针与所述第一样品结合制备对照样品，并将所述对照 样品暴露于含有所述分枝菌酸抗原的脂质体；

通过用氧化还原探针与所述第二样品结合制备测试样品，并将所述测试 样品暴露于不含有分枝菌酸抗原的脂质体；

将所述对照样品与所述固定分枝菌酸抗原接触，以使得在所述对照样品 中的任何抗体结合到所述固定分枝菌酸抗原；

将所述测试样品与所述固定分枝菌酸抗原接触，以使得在所述测试样品 中的任何抗体结合到所述固定分枝菌酸抗原；以及

通过电化学阻抗谱比较所述对照样品和所述测试样品中的抗体结合到所 述固定分枝菌酸的程度，观察到的由所述对照样品示出的任何较低的结合是 所述诊断样品中存在针对所述分枝菌酸抗原的抗体的指标，该指标表示所述 诊断样品来源的人类或动物患有活动性结核病，从而由此诊断所述人类或动 物患有活动性结核病。

2.根据权利要求1中所述的方法，其中所述分枝菌酸抗原的固定是通过 直接将其结合到自组装单层，以在所述电极上获得含分枝菌酸抗原的自组装 单层。

3.根据权利要求2中所述的方法，其中所述自组装单层包括硫醇化的疏 水性物质。

4.根据权利要求3中所述的方法，其中所述硫醇化疏水性物质是十八烷 硫醇。

5.根据权利要求3或4中所述的方法，其中所述电极是丝网印刷电极， 所述电极具有含所述分枝菌酸抗原的自组装单层，所述自组装单层以涂层的 形式在所述丝网印刷电极的表面上。

6.根据权利要求5中所述的方法，其包括通过首先将所述电极表面暴露 于所述疏水性物质，其后将其暴露于所述分枝菌酸抗原，以形成所述含有分 枝菌酸抗原的自组装单层。

7.根据权利要求5中所述的方法，其包括通过将所述电极表面暴露于所 述疏水性物质和所述分枝菌酸抗原的混合物中，以形成所述含有分枝菌酸抗 原的自组装单层。

8.根据权利要求5至7中任一项所述的方法，其中所述对照样品和所述 测试样品依次接触相同的丝网印刷电极的固定抗原。

9.根据权利要求5至7中任一项所述的方法，其中当所述对照样品和所 述测试样品依次与所述相同的丝网印刷电极的固定抗原接触时，所述测试样 品代替所述对照样品，在所述丝网印刷电极的固定抗原与所述对照样品进行 接触和所述丝网印刷电极的固定抗原与所述测试样品进行接触之间，无需对 所述丝网印刷电极进行任何洗涤。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述分枝杆菌的感染 是引起选自肺部结核病和肺外结核病的疾病的感染类型。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述分枝菌酸抗原是 从结核分枝杆菌中提取的，并且所述抗体是抗结核分枝杆菌的抗体，或抗其 分枝菌酸组分的抗体。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述分枝菌酸抗原是 选自同源化合物或非同源化合物的混合物的形式。

13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述诊断样品选自血 液样品、脊髓液样品和天然地含有抗体的样品。

14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述诊断样品选自HIV 阳性的人类。