[发明专利]用于改善的病毒生产的禽类细胞在审
| 申请号: | 201480039171.3 | 申请日: | 2014-06-03 |
| 公开(公告)号: | CN105378073A | 公开(公告)日: | 2016-03-02 |
| 发明(设计)人: | M.法伊夫;M.吉布森 | 申请(专利权)人: | 皮尔布莱特研究所 |
| 主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张文辉 |
| 地址: | 英国皮*** | 国省代码: | 英国;GB |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 改善 病毒 生产 禽类 细胞 | ||
1.一种禽类细胞,其具有降低的以下一种或多种多肽或其同系物的表达和/或活性:鸡IFITM1(SEQIDNo.1);鸡IFITM2(SEQIDNo.2)和鸡IFITM3(SEQIDNo.3)。
2.根据权利要求1的禽类细胞,其中所述禽类细胞在禽类胚胎内,源自于禽类胚胎或者是禽类细胞系。
3.根据权利要求2的禽类细胞,其为鸡胚胎成纤维细胞(CEF)。
4.根据权利要求1至3中任一项的禽类细胞,其中所述禽类细胞包含一种或多种以下多肽或其同系物的突变体形式:鸡IFITM1(SEQIDNo.1);鸡IFITM2(SEQIDNo.2)和鸡IFITM3(SEQIDNo.3),其中所述突变体形式与降低的对病毒性感染的抗性相关。
5.根据权利要求1至3中任一项的禽类细胞,在所述禽类细胞中一种或多种编码以下多肽或其同系物之一的核苷酸序列不存在于其基因组中:鸡IFITM1(SEQIDNo.1);鸡IFITM2(SEQIDNo.2)和鸡IFITM3(SEQIDNo.3)。
6.根据权利要求1至3中任一项的禽类细胞,其中一种或多种以下多肽或其同系物的表达通过RNA干扰(RNAi)降低:鸡IFITM1(SEQIDNo.1);鸡IFITM2(SEQIDNo.2)和鸡IFITM3(SEQIDNo.3)。
7.一种用于繁殖病毒的方法,其包括以下步骤:
(i)使用病毒转导根据权利要求1至6中任一项的禽类细胞;和
(ii)传代所述细胞以繁殖所述病毒。
8.一种用于生产疫苗的方法,其包括以下步骤:
(i)根据权利要求7繁殖病毒;和
(ii)将繁殖的病毒掺入疫苗中。
9.一种用于生成减毒病毒的方法,其包括以下步骤:
(i)使用病毒转导根据权利要求1至6中任一项的禽类细胞;和
(ii)传代所述禽类细胞,使得所述病毒完成多轮感染并变得减毒。
10.一种用于生产疫苗的方法,其包括以下步骤:
(i)根据权利要求9使病毒减毒;
(ii)繁殖减毒的病毒;和,
(iii)将(ii)中生成的病毒掺入疫苗中。
11.根据权利要求7至10中任一项的方法,其中所述病毒经由酸性内体进入。
12.一种转基因禽类动物,其中一种或多种以下多肽或其同系物的表达和/或活性被降低,敲低,或敲除:鸡IFITM1(SEQIDNo.1);鸡IFITM2(SEQIDNo.2)和鸡IFITM3(SEQIDNo.3)。
13.一种转基因禽类动物,其生殖细胞和体细胞包括一种或多种编码以下多肽或其同系物之一的核苷酸序列的异质形式:鸡IFITM1(SEQIDNo.1);鸡IFITM2(SEQIDNo.2)和鸡IFITM3(SEQIDNo.3),所述核苷酸序列在胚胎阶段时导入所述动物、或所述动物的祖先。
14.一种转基因禽类动物,其中一种或多种编码以下多肽或其同系物的基因的拷贝数增加:鸡IFITM1(SEQIDNo.1);鸡IFITM2(SEQIDNo.2)和鸡IFITM3(SEQIDNo.3)。
15.根据权利要求12至14中任一项的转基因动物,其中所述禽类动物是家养家禽动物。
16.根据权利要求15的转基因动物,其中所述禽类动物是鸡。
17.根据权利要求1的禽类细胞,其来源于根据权利要求12至16中任一项的转基因禽类动物。
18.一种用于调查禽类动物对病毒性感染的先天性抗性的方法,其包括下述步骤:调查编码一种或多种以下多肽或其同系物的核苷酸序列:鸡IFITM1(SEQIDNo.1);鸡IFITM2(SEQIDNo.2)和鸡IFITM3(SEQIDNo.3)和/或调查所述核苷酸序列在基因组上的拷贝数。
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