[发明专利]用于生产化学修饰的肝素的新方法

权利要求书

1.一种用于制备具有4.6至6.9kDa的平均分子量和小于10IU/mg的抗因子Xa活性的肝素衍生物的方法，

其中肝素衍生物具有

-如下式I所示的主要出现的二糖，

其中

并且n为2至20的整数，对应于1.2和12kDa之间的分子量；以及

-在1H NMR谱5.0ppm至6.5ppm区域中的信号，所述信号相对于未分级肝素1H NMR谱在5.42ppm的信号具有小于或等于4％的强度，

所述方法包括以下连续步骤：

(i)通过加入氧化剂氧化未分级肝素的酸性水溶液；

(ii)通过使步骤(i)的产物与碱形成碱性溶液解聚氧化的肝素；

(iii)将来自步骤(ii)的所述溶液维持在碱性pH中持续所需要的一段时间以提供具有上述范围内的分子量的解聚的肝素，通过分析所述溶液，或者参考之前进行的基本上相同的步骤(iii)，确定步骤(iii)中所述的一段时间；以及

(iv)通过将氢化物还原剂加入至获得自步骤(iii)的溶液中还原所述解聚的肝素的末端醛基，

其中控制步骤(i)结束和步骤(iv)开始之间的一段时间以使残余氧化剂的作用最小化。

2.根据权利要求1所述的方法，其中在肝素衍生物中，至少70％的分子具有大于3kDa的分子量。

3.根据权利要求1所述的方法，其中肝素衍生物包含具有如下表所示的累积分子量分布的多糖：

4.根据权利要求1所述的方法，其中在肝素衍生物中，在5.95ppm和6.15ppm存在1H NMR谱信号。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述肝素衍生物还具有小于10IU/mg的抗因子IIa活性。

6.根据权利要求1所述的方法，其中肝素衍生物具有小于5IU/mg的抗因子Xa活性和/或小于5IU/mg的抗因子IIa活性。

7.根据权利要求1所述的方法，其中在肝素衍生物中，存在于肝素衍生物中的多糖链基本上不含调节抗凝血作用的化学完整的糖序列。

8.根据权利要求1所述的方法，其中在肝素衍生物中，在起始的未分级肝素材料中至少90％的非硫酸化的邻二醇部分已被转化。

9.根据权利要求8所述的方法，其中非硫酸化的邻二醇部分包含肝素的艾杜糖醛酸和葡萄糖醛酸的残基。

10.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(i)中使用的氧化剂为偏高碘酸钠。

11.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(i)需要在4.5至5.5的pH并在降低的温度，通过加入偏高碘酸钠氧化未分级肝素的水溶液。