[发明专利]产生肾前体细胞的方法及含有肾前体细胞的药物

权利要求书

1.一种由间介中胚层细胞产生肾前体细胞的方法，所述方法包括：将间介中胚层细胞在含有TGFβ信号激活剂及BMP抑制剂的培养基中进行培养，由间介中胚层细胞诱导肾前体细胞的工序。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述肾前体细胞为SIX2阳性细胞。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述间介中胚层细胞为OSR1阳性细胞。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，所述TGFβ信号激活剂为选自由TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3、IDE1及IDE2构成的组中的1种以上的物质。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其中，所述BMP抑制剂为选自由Dorsomorphin、Noggin、LDN193189及DMH1构成的组中的1种以上的物质。

6.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，所述TGFβ信号激活剂为TGFβ1，所述BMP抑制剂为DMH1。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的方法，其中，所述间介中胚层细胞为由多能干细胞诱导成的间介中胚层细胞。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述间介中胚层细胞为通过包括以下的工序(i)及(ii)的方法所产生的间介中胚层细胞：

(i)将多能干细胞在含有选自由激活素A、GSK-3β抑制剂及视黄酸衍生物构成的组中的1种以上的物质的培养基中进行培养的工序；及

(ii)将工序(i)中得到的细胞在含有选自由BMP7、GSK-3β抑制剂及视黄酸衍生物构成的组中的1种以上的物质的培养基中进行培养的工序。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述工序(ii)包括以下的工序(ii-1)及(ii-2)：

(ii-1)将工序(i)中得到的细胞在含有选自BMP7及GSK-3β抑制剂中的1种以上的物质的培养基中进行培养的工序；及

(ii-2)将工序(ii-1)中得到的细胞在含有选自TGFβ信号激活剂及视黄酸衍生物中的1种以上的物质的培养基中进行培养的工序。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述工序(ii-1)为在含有BMP7及GSK-3β抑制剂的培养基中进行培养的工序，所述工序(ii-2)为在含有TGFβ信号激活剂及视黄酸衍生物的培养基中进行培养的工序。

11.根据权利要求8～10中任一项所述的方法，其中，所述GSK3β抑制剂为CHIR99021。

12.根据权利要求8～11中任一项所述的方法，其中，所述视黄酸衍生物为AM580或TTNPB。

13.根据权利要求7～12中任一项所述的方法，其中，所述多能干细胞为诱导性多能干(iPS)细胞。

14.根据权利要求13所述的方法，其中，所述iPS细胞为人iPS细胞。

15.一种由多能干细胞产生肾前体细胞的方法，所述方法包括以下的工序(i)～(iii)：

(i)将多能干细胞在含有选自由激活素A、GSK-3β抑制剂及视黄酸衍生物构成的组中的1种以上的物质的培养基中进行培养的工序；

(ii)将工序(i)中得到的细胞在含有选自由BMP7、GSK-3β抑制剂及视黄酸衍生物构成的组中的1种以上的物质的培养基中进行培养的工序；及

(iii)将工序(ii)中得到的细胞在含有TGFβ信号激活剂及BMP抑制剂的培养基中进行培养的工序。

16.根据权利要求15所述的方法，其中，所述肾前体细胞为SIX2阳性细胞。

17.根据权利要求15或16所述的方法，其中，所述工序(ii)中得到的细胞为OSR1阳性细胞。

18.根据权利要求15～17中任一项所述的方法，其中，所述TGFβ信号激活剂为选自由TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3、IDE1及IDE2构成的组中的1种以上的物质。

19.根据权利要求15～18中任一项所述的方法，其中，所述BMP抑制剂为选自由Dorsomorphin、Noggin、LDN193189及DMH1构成的组中的1种以上的物质。