[发明专利]修饰的TGF-β寡核苷酸

说明书

本发明涉及由TGF‑β1、TGF‑β2或TGF‑β3的核酸序列的选定区域的10‑20核苷酸组成的寡核苷酸，其包含修饰的核苷酸，如LNA、ENA、聚环氧烷、2'‑氟、2'‑O‑甲氧基和/或2'‑O‑甲基修饰的核苷酸。所述选定区域优选SEQ ID NO.1的TGF‑β2核酸序列的第1380‑1510位、第1660‑1680位、第2390‑2410位或第2740‑2810位核酸区域，SEQ ID NO.149的TGF‑β1核酸序列的特定区域，或SEQ ID NO.267的TGF‑β3核酸序列的特定区域。本发明还涉及包含这类寡核苷酸的药物组合物，所述组合物或所述寡核苷酸用于预防和/或治疗恶性和/或良性肿瘤、免疫疾病、纤维化、青光眼等。

本发明涉及由TGF-β2核酸序列的选定区域或TGF-β1或TGF-β3核酸序列的选定区域的10-20个核苷酸组成的寡核苷酸，其包含修饰的核苷酸，如LNA、ENA、聚环氧烷、2'-氟、2'-O-甲氧基和/或2'-O-甲基修饰的核苷酸。

技术背景

转化生长因子β(TGF-β)是一种在大多数细胞中控制增殖、细胞分化和其他功能的蛋白质。它是一种类型的细胞因子，其在免疫、癌症、心脏病、糖尿病、马凡综合征、洛伊斯-迪茨综合征、帕金森病和AIDS等中起作用。

TGF-β是一种分泌的蛋白，其以至少三种同种型的形式存在(TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3)，由不同基因编码，但共有强序列和结构同源性。TGF-β在正常上皮细胞和癌发生的早期以抗增殖因子的形式起作用。然而，在肿瘤发展的晚期，TGF-β通过包括诱导上皮至间质瘤转变(EMT)的机制促进肿瘤，该转变是一种被认为参与肿瘤进展、侵染和转移的过程(参见“Glycoproteomic analysis of two mouse mammary cell lines duringtransforming growth factor (TGF)-beta induced epithelial to mesenchymaltransition(转化生长因子(TGF)-β诱导的上皮至间质瘤转变期间两种小鼠乳腺细胞系的糖蛋白质组学分析)”7^th space.com.2009-01-08.恢复：2009-01-29)。

在正常(上皮)细胞中，TGF-β在GI期停止细胞周期(并停止细胞增殖)、诱导分化或促进凋亡。当细胞转化为癌细胞时，TGF-β不再抑制细胞增殖，其通常是信号转导途径中突变的结果，且癌细胞增殖。间质成纤维细胞的增殖也由TGF-β诱导。两种细胞都提高其TGF-β生产。该TGF-β作用于周围间质细胞、免疫细胞、内皮、平滑肌细胞和肿瘤微环境(参见Pickupet等，“The roles of TGF6 in the tumour microenvironment(肿瘤微环境中TGF6的作用)”，Nature Reviews Cancer(2013),13:788-799)。因而，其促进血管生成，并通过抑制增殖和免疫细胞的激活导致免疫抑制。

TGF-β1缺陷型小鼠死于心、肺和胃炎症，暗示TGF-β在抑制炎性细胞激活和增殖方面至关重要。Smad3是TGF-β依赖性下游信号通路中的关键元件之一。Smad3缺陷型小鼠由于T细胞激活和粘膜免疫受损而发生慢性粘膜感染，暗示TGF-β在这些过程中的关键作用。对于癌症，某些癌细胞产生和分泌的TGF-β抑制浸润性免疫细胞的活性，从而帮助肿瘤逃脱宿主免疫监控。该免疫抑制作用可以是另一种重要机制，TGF-β通过该机制刺激晚期肿瘤的生长(参加Blobe GC等，2000年5月，“Role of transforming growth factor beta in humandisease(人疾病中转化生长因子β的作用)”,N.Engl.J.Med.342(18),1350-1358)。TGF-β还将正常情况下使用炎性(免疫)反应攻击癌症的效应T细胞转化为关闭炎性反应的调节性(抑制)T细胞。