[发明专利]检测供体特异性抗体的方法和用于实施所述方法的系统有效

专利信息
申请号: 201480026715.2 申请日: 2014-03-13
公开(公告)号: CN105308457B 公开(公告)日: 2018-07-10
发明(设计)人: D·B·迪安;G·陈 申请(专利权)人: 斯坦福大学托管董事会
主分类号: G01N33/53 分类号: G01N33/53
代理公司: 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 代理人: 韩威威
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 免疫抗体 抗体 复合物 供体特异性 生物样本 特异性结合 地标记 可检测 珠粒 表面抗原 供体细胞 裂解条件 系统提供 细胞样本 混合物 试剂盒 检测
【权利要求书】:

1.可检测地标记的抗体在制备用于测定供体特异性抗体在生物样本中的存在或不存在的诊断剂中的用途,所述测定通过包括下列步骤的方法进行:

通过在足以使受体免疫抗体结合供体细胞表面抗原(Ag)的条件下将来自供体的细胞样本与来自受体的生物样本组合来形成混合物以形成免疫抗体-Ag复合物;

将所述混合物与在其表面上包含特异性结合所述免疫抗体-Ag复合物的抗体的珠粒接触;和

在裂解条件下添加特异性结合结合于所述珠粒的所述免疫抗体-Ag复合物的可检测地标记的抗体;和

检测结合于所述免疫抗体-Ag复合物的所述可检测地标记的抗体的存在或不存在,以测定供体特异性抗体在来自所述受体的生物样本中的存在或不存在。

2.根据权利要求1所述的用途,其中所述检测是半定量的。

3.根据权利要求1所述的用途,其中所述免疫抗体是同种抗体。

4.根据权利要求1所述的用途,其中所述免疫抗体是自体抗体。

5.根据权利要求1所述的用途,其中所述免疫抗体是补体固定抗体(CFAb)。

6.根据权利要求1所述的用途,其中通过检测荧光发射来检测所述可检测地标记的抗体。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的用途,其中通过将所述复合物流过流式细胞仪来检测所述可检测地标记的抗体。

8.根据权利要求1-6中任一项所述的用途,其中通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测所述复合物来检测所述可检测地标记的抗体。

9.根据权利要求1-6中任一项所述的用途,其中所述可检测地标记的抗体包含附接于抗体或其抗原结合片段的可检测标记。

10.根据权利要求9所述的用途,其中所述可检测标记包含荧光染料。

11.根据权利要求10所述的用途,其中所述荧光染料选自吲哚羰花青(C3)、吲哚羰花青(C5)、Cy3、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7、德克萨斯红、太平洋蓝、俄勒冈绿488、Alexa fluor-355、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 532、Alexa Fluor 546、Alexa Fluor-555、Alexa Fluor568、Alexa Fluor 594、Alexa Fluor 647、Alexa Fluor 660、Alexa Fluor 680、AlexaFluor 700、JOE、丽丝胺、罗丹明绿、BODIPY、异硫氰酸荧光素(FITC)、羧基荧光素(FAM)、别藻蓝蛋白(APC)、藻红蛋白(PE)、罗丹明、二氯罗丹明(dRhodamine)、羧基四甲基罗丹明(TAMRA)、羧基-X-罗丹明(ROX)、LIZ、VIC、NED、PET、SYBR、PicoGreen和RiboGreen。

12.根据权利要求9所述的用途,其中所述可检测标记包含生色团。

13.根据权利要求9所述的用途,其中所述可检测标记包含酶。

14.根据权利要求9所述的用途,其中所述可检测标记包含接头分子。

15.根据权利要求9所述的用途,其中所述可检测标记包含生物素分子。

16.根据权利要求9所述的用途,其中所述可检测标记包含电子供体。

17.根据权利要求9所述的用途,其中所述可检测标记包含电子受体。

18.根据权利要求9所述的用途,其中所述可检测标记包含染料。

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