[发明专利]可延展聚合物内的核酸的检测和定量方法有效
申请号: | 201480025472.0 | 申请日: | 2014-03-13 |
公开(公告)号: | CN105189745B | 公开(公告)日: | 2021-10-29 |
发明(设计)人: | 阿马纳特·梅特拉;大卫·莫兰多 | 申请(专利权)人: | WM.雷格利JR.公司 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 金海霞;杨青 |
地址: | 美国伊*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 延展 聚合物 核酸 检测 定量 方法 | ||
1.一种从可以在活生物体内延展的聚合物提取微生物来源的核酸的方法,所述方法包括以下步骤:
a)将所述聚合物与i)有机溶剂和ii)缓冲溶液相接触,其中所述聚合物被所述有机溶剂至少部分溶解,所述有机溶剂选自氯仿、二甲苯和甲苯,以及
b)分离所述有机溶剂和缓冲溶液,其中从所述聚合物提取的核酸被包含在所述缓冲溶液中,
其中所述聚合物是选自聚乙酸乙烯酯、聚丁烯、聚异丁烯、异丁烯-异戊二烯共聚物、苯乙烯-丁二烯共聚物、聚异戊二烯、聚乙烯、乙酸乙烯酯-月桂酸乙烯酯共聚物、硅酮、节路顿胶、糖胶树胶、索马胶、巴拉塔树胶及其组合的弹性体。
2.权利要求1的方法,其中所述缓冲溶液是Tris缓冲液、TBE或TAE。
3.权利要求1的方法,其中所述缓冲溶液是Tris缓冲液。
4.权利要求1的方法,其中所述有机溶剂是氯仿。
5.权利要求1的方法,其中至少90%的粘附于所述聚合物或俘获在所述聚合物内的核酸被提取。
6.权利要求5的方法,其中所述微生物是细菌、病毒、真菌或原生动物。
7.权利要求6的方法,其中所述细菌选自变异链球菌(Streptococcus mutans)、口腔链球菌(Streptococcus oralis)、内氏放线菌(Actinomyces naeslundii)、血链球菌(Streptococcus sanguinis)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromomas gingivalis)、中间卟啉单胞菌(Porphymomas intermedia)、福氏拟杆菌(Bacteroides forsythus)、Tanneraellaforsythia、直肠弯曲杆菌(Campylobacter rectus)、纠缠真杆菌(Eubacterium nodatum)、微小消化链球菌(Peptostreptococcus micros)、中间型链球菌(Streptococcusintermedius)、Aggregetibacter actinomycetemcomitans、齿垢密螺旋体(Treponemadenticola)、乳芽胞杆菌属(Lactobacillus)、啮蚀艾肯菌(Eikenella corrodens)、牙龈二氧化碳嗜纤维菌(Capnocytophaga gingivalis)、格氏链球菌(Streptococcus gordonii)、小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)、核粒梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)、中间普雷沃菌(Prevotella intermedia)、唾液乳芽胞杆菌(Lactobacillus salivarius)、唾液链球菌(Streptococcus salivarius)和远源链球菌(Streptococcus sobrinus)。
8.权利要求6或7的方法,其中从所述聚合物的内表面提取所述核酸。
9.权利要求1-7任一项的方法,其中所述聚合物被所述有机溶剂完全溶解。
10.权利要求1的方法,其中所述聚合物在牙科或牙周组合物、器具或装置内。
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