[发明专利]用于计数霉菌菌落的培养装置和方法

说明书

相关申请的交叉引用

本专利申请要求2013年5月6日提交的美国临时专利申请No.61/819,690的优先权，该申请全文以引用方式并入本文。

背景技术

霉菌是真核微生物。它们在自然环境，即，土壤、空气、水和植物表面中无所不在。因为它们的异养性质和它们适应于宽泛的环境条件范围的能力，这些微生物在各种商品包括食品成分、加工食品、饮料、未充分清洁的食品加工设备和食品储存设施之中或之上作为昂贵的滋扰物频繁地出现。此外，一些酵母和霉菌对人类和动物健康可能具有危害。例如，多种霉菌产生霉菌毒素，并且一些霉菌微生物会引起人类和动物感染。

食品和其它商品中的霉菌污染可导致生产者、加工者和消费者的重大经济损失。商品(诸如，食品成分、加工食品和饮料)中霉菌污染的快速和准确测定对于食品工业中高品质食品产品的生产具有重要意义。

当前用于食品商品中霉菌的例行测定的操作很大程度上依赖于用于在半固体琼脂培养基上计数活真菌细胞的常规培养技术。尽管被广泛接受，但是这些方法具有诸多缺点，因为一般来讲，它们是劳动密集型的，并且再现性较低。此外，传统方法中遇到的普遍问题是，某些霉菌的菌丝生长的铺展类型经常超过附近菌落，并且阻止样品中活细胞的准确计数。

发明内容

本公开一般涉及检测样品中的霉菌微生物并对其进行计数。具体地，本公开涉及对薄膜培养装置中的霉菌菌落进行计数。发明人已发现，不含顶部空间并且具有一层相对较薄的营养物质(相对于传统琼脂培养皿培养装置)的薄膜培养装置对于在装置中生长的至少一些菌种的霉菌菌落，显示出显著的侧向菌落扩展(例如，菌落的径向铺展)速率。发明人还发现，钙螯合化合物可用于降低生长菌落的侧向扩展速率；意外的是，基本上不延缓对霉菌菌落的检测。有利的是，由钙螯合化合物引起的平均菌落直径的减小允许对样品中的霉菌微生物进行更准确的计数，样品包含原本将会在生长区的较大面积上铺展的霉菌菌种，从而与其它霉菌菌落重叠，并且使单独菌落的计数更加困难。

本公开提供薄膜培养装置。培养装置可包含耐水的第一衬底、耐水的第二衬底、设置在第一衬底和第二衬底之间的生长区、设置在生长区中的干的、冷水可溶的胶凝剂以及设置在生长区中的有效量的钙螯合化合物。当生长区用预定体积的含水液体水合并且用霉菌菌种的菌落形成单位接种时，相对于在不含有设置在生长区中的有效量的原本相同培养装置中生长的相同霉菌菌种的菌落的侧向扩大速率，有效量的钙螯合化合物能够降低在培养装置中生长的菌落形成单位的侧向扩大速率。降低菌落形成单位的侧向扩大速率基本上不延缓对菌落的检测。在任何实施例中，薄膜培养装置还可包含预定体积的含水液体，其中设置在生长区中的有效量的钙螯合化合物溶解于含水液体中，其浓度为：相对于在不含有设置在生长区中的有效量的原本相同培养装置中生长的相同霉菌菌种的菌落的侧向扩大速率，能够有效地基本上降低在含有设置在生长区中的有效量的培养装置中生长的霉菌菌种的菌落的侧向扩大速率。

在另一方面，本公开提供了一种用于计数微生物的方法。该方法可包括在包含设置在生长区中的有效量钙螯合化合物的薄膜培养装置中的生长区中形成接种的培养基、温育接种的培养基持续足以形成霉菌微生物的宏观可检测菌落的预定时间段、和计数生长区中霉菌微生物的宏观可检测菌落的数目。形成接种的培养基包括用预定体积的含水液体水合生长区。当生长区用预定体积的含水液体水合并且用霉菌菌种的菌落形成单位接种时，相对于在不含有设置在生长区中的有效量的原本相同培养装置中生长的相同霉菌菌种的菌落的侧向扩大速率，钙螯合化合物降低在培养装置中生长的菌落形成单位的侧向扩大速率。降低菌落形成单位的侧向扩大速率基本上不延缓对菌落的检测。在任何实施例中，该方法还可包括计数生长区中宏观可检测酵母菌落的数目。在任何实施例中，形成接种的培养基可包括将含水样品沉积到薄膜培养装置中，其中，在沉积含水样品之前，薄膜培养装置包含营养培养基、指示剂和/或有效量的钙螯合化合物。

在另一方面，本公开提供了一种试剂盒。试剂盒可包括用于生长霉菌微生物并对其进行计数的薄膜培养装置和容纳预定量的钙螯合化合物的容器。当设置在培养装置的生长区中时，在将装置接种之后，相对于在不含有设置在生长区中的有效量的原本相同培养装置中生长的相同霉菌菌种的菌落的侧向扩大速率，预定量的一部分足以降低在培养装置中生长的霉菌菌种的菌落形成单位的侧向扩大速率。降低菌落形成单位的侧向扩大速率基本上不延缓对菌落的检测。