[发明专利]用于肝细胞癌检测和治疗的组合物和方法

说明书

与相关申请的交叉参考

本专利申请要求于2013年4月12日提交的美国临时申请号61/811,360的优先权，所述美国临时申请以引用的方式在此整体并入。

政府利益

不适用。

发明内容

本公开内容涉及用于治疗肝细胞癌的组合物和方法。在一个实施例中，治疗患有肝细胞癌的受试者的方法包括给所述受试者施用治疗有效量的免疫缀合物，所述免疫缀合物包含与效应物分子缀合的抗体，其中所述抗体识别上皮细胞粘附分子(Ep-CAM)。在一些实施例中，该抗体包括包含由SEQIDNO:4、5和6限定的氨基酸序列的轻链互补决定区，以及包含由SEQIDNO:7、8和9限定的氨基酸序列的重链互补决定区。在一些实施例中，效应物分子可以是毒素，例如相思豆毒蛋白、蒴莲根毒素、檞寄生素(viscumin)、白树毒素、bouganin、皂草素、蓖麻毒素、蓖麻毒素A链、榄香胶素(bryodin)、丝瓜素、木鳖子甙、局限曲菌素、假单胞菌(Pseudomonas)外毒素A、百日咳毒素、破伤风毒素、肉毒杆菌毒素、志贺氏菌(Shigella)毒素、霍乱毒素、白喉毒素等。在一些实施例中，将免疫缀合物直接施用于癌症部位。

在一个另外的实施例中，免疫缀合物为如SEQIDNO.2中所示的VB4-845或其变体。在一些实施例中，免疫缀合物可与一种或多种其他抗癌剂共施用、同时施用或序贯施用。

在另一个实施例中，本发明公开了检测或监控受试者中的癌的方法。例如，肝细胞癌的检测可包括：使取自所述受试者的测试样品与抗体接触，以形成抗体-抗原复合物，其中所述抗体包括包含由SEQIDNO:4、5和6限定的氨基酸序列的轻链互补决定区，以及包含由SEQIDNO:7、8和9限定的氨基酸序列的重链互补决定区；测量测试样品中的抗体-抗原复合物；并且使结果针对对照标准化。

在一个进一步的实施例中，本发明公开了用于诊断癌的试剂盒。例如，用于诊断肝细胞癌的试剂盒包含抗原，所述抗原包括包含由SEQIDNO:4、5和6限定的氨基酸序列的轻链互补决定区，以及包含由SEQIDNO:7、8和9限定的氨基酸序列的重链互补决定区；及其使用说明书。

在一个另外的实施例中，在体外或体内杀死肝癌细胞的方法涉及使肝癌细胞与有效量的免疫缀合物接触，所述免疫缀合物包含与效应物分子缀合的抗体，并且其中所述抗体识别上皮细胞粘附分子(Ep-CAM)。

附图说明

图1.VB4-845的图。该图描述了免疫缀合物的连接的4D5MOCBscFv和ETA_252-608部分、以及各个结构域的组构，包括组氨酸标签，PelB信号，接头区，V_L和V_H区，ETA区II、Ib和III，以及ER滞留信号。

图2显示了对应于VB4-845的氨基酸和核酸序列的SEQIDNO:2和3，具有pelB引导序列。核苷酸和多肽序列可分成结构域，包括：用于周质表达的信号序列，组氨酸标签，CDR1、2和3结构域，V_L结构域，V_H结构域，接头，ETA结构域II、Ib、III，以及ER滞留信号KDEL。

图3显示了免疫组织化学染色和患者预后的直方图。(A)在CM型HCC病例中的Ep-CAM表达的免疫组织化学分析。(a)显示Ep-CAM表达的典型CM型HCC。(b)显示无Ep-CAM表达的典型CM型HCC。在癌细胞和胆管而不是邻近非癌细胞中的Ep-CAM的膜染色(放大率，×100)。BD，胆管。含(+)或不含(-)Ep-CAM蛋白质表达的患有CM型HCC的患者的术后预后。(B)，总体存活曲线，和(C)，在根治手术后的无复发存活曲线。在患有CM型HCC的患者中，Ep-CAM表达与根治手术后的预后不良显著相关。秩和检验证实在总体和无复发存活率中统计上的显著差异(分别为p＝0.0447和p＝0.0171)。