[发明专利]类病斑表型的抑制子SLM1在审
| 申请号: | 201480018854.0 | 申请日: | 2014-01-30 |
| 公开(公告)号: | CN105143455A | 公开(公告)日: | 2015-12-09 |
| 发明(设计)人: | J.S.贾奎斯;J.季;G.乔哈;A.伦纳德;李柏林 | 申请(专利权)人: | 纳幕尔杜邦公司;普渡研究基金会 |
| 主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C07K14/415;C12Q1/68;A01H5/00 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 邹雪梅;李炳爱 |
| 地址: | 美国特拉华*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 类病斑 表型 抑制 slm1 | ||
1.一种制备内源Slm1表达减少的转基因植物的方法,所述方法包括:
a.将包含分离的多核苷酸的重组构建体引入到可再生的植物细胞中,所述分离的多核苷酸可操作地连接至启动子,其中所述多核苷酸序列的表达降低内源Slm1的表达;
b.在步骤(a)之后,由所述可再生的植物细胞再生出转基因植物,其中所述转基因植物在其基因组中包含所述重组DNA构建体;以及
c.选择(b)的转基因植物,其中所述转基因植物包含所述重组构建体且在与不包含所述重组DNA构建体的对照植物进行比较时表现出Slm1表达的减少。
2.一种制备内源Slm1表达减少的转基因植物的方法,所述方法包括:
a.将包含分离的多核苷酸的重组DNA构建体引入到可再生的植物细胞中,所述分离的多核苷酸以有义或反义取向可操作地连接至在植物中有功能的启动子,其中所述多核苷酸包含:
i.SEQIDNO:47、48、50或51的核苷酸序列;
ii基于ClustalW比对方法,在与SEQIDNO:47、48、50或51进行比较时具有至少90%序列同一性的核苷酸序列;
iii.SEQIDNO:47、48、50或51的至少100个连续的核苷酸的核苷酸序列;
iv.能够在严格条件下与(i)的核苷酸序列杂交的核苷酸序列;或
v.经修饰的植物miRNA前体,其中所述前体已经经修饰以用设计用于产生指向SEQIDNO:47、48、50或51的miRNA的序列替换所述miRNA编码区;
b.在步骤(a)之后再生转基因植物细胞,其中所述转基因植物在其基因组中包含所述重组DNA构建体;以及
c.选择(b)的转基因植物,其中所述转基因植物包含所述重组DNA构建体且在与不包含所述重组DNA构建体的对照植物进行比较时表现出Slm1表达的减少。
3.一种制备农学特性改变的转基因植物的方法,所述方法包括:
a.将包含分离的多核苷酸的重组DNA构建体引入到可再生的植物细胞中,所述分离的多核苷酸可操作地连接至至少一种调控序列,其中所述多核苷酸编码多肽的片段或变体,基于ClustalW比对方法,在与SEQIDNO:49、52或73进行比较时,所述多肽具有至少80%序列同一性的氨基酸序列,其中所述片段或所述变体赋予所述可再生的植物细胞中的显性负表型;
b.在步骤(a)之后,由所述可再生的植物细胞再生出转基因植物,其中所述转基因植物在其基因组中包含所述重组DNA构建体;以及
c.选择(b)的转基因植物,其中所述转基因植物包含所述重组DNA构建体且在与不包含所述重组DNA构建体的对照植物进行比较时表现出至少一种农学特性的改变,所述农学特性选自:非生物胁迫耐受性、早衰、绿度、生物量、产量、耐旱性、低氮耐受性、根倒伏、收获指数、茎倒伏、植物高度、穗高、穗长、耐盐性、早期幼苗活力和在低温胁迫下的出苗。
4.一种鉴定slm1的等位基因的方法,所述方法包括以下步骤:
a.对突变体玉米植物的群体进行遗传筛选;
b.鉴定一种或多种表现出slm1表型的突变体玉米植物;以及
c.从具有slm1表型的突变体玉米植物鉴定slm1等位基因。
5.一种制备农学特性改变的转基因植物的方法,所述方法包括以下步骤:
a.将包含slm1等位基因的第一植物与包含重组DNA构建体的第二植物杂交,所述重组DNA构建体包含可操作地连接至启动子的分离的多核苷酸;
b.筛选来自步骤(a)的植物群体;以及
c.选择包含下列的植物:(i)步骤(a)的重组DNA构建体;(ii)slm1表型;和(iii)在与包含所述重组DNA构建体但不包含slm1表型的对照植物进行比较时,至少一种农学特性的改变,所述农学特性选自:非生物胁迫耐受性、早衰、绿度、生物量、产量、耐旱性、低氮耐受性、根倒伏、收获指数、茎倒伏、植物高度、穗高、穗长、耐盐性、早期幼苗活力和在低温胁迫下的出苗。
6.一种植物,所述植物中内源Slm1基因的表达相对于对照植物是降低的。
7.一种由权利要求5所述的方法制备的植物或种子。
8.一种制备权利要求6所述的植物的方法,所述方法包括以下步骤:
a.将突变引入到所述内源Slm1基因中;以及
b.检测所述突变。
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