[发明专利]一种川芎挥发油包合物指纹图谱的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于中药指纹图谱领域，特别涉及一种川芎挥发油包合物指纹图谱的测定方法。

背景技术

川芎是中国药典收载的常用中药。川芎是伞形科植物川芎(Ligusticum chuanxiong)的干燥根茎。川芎中含有多种化学成分：(1)生物碱，川芎嗪(四甲基吡嗪，Tetramethyl-pyrazine)、黑麦草灵(Perlolyrine)亮氨酰苯丙酸内酰胺(Leucylphenylalanine anhydri-de)、腺嘧啶(Adenine)、三甲胺(Trimethylamine)、胆碱(Choline)等；(2)挥发油，十五酸乙酯(Ethyl pentadecanoate)、十六酸乙酯(Ethyl palmitate)、十七酸乙酯(Ethyl heptadecanoate)、异十七酸乙酯(Ethyl isoheptadecanoate)、十八酸乙酯(Ethyl octadecanoate)等；(3)内酯类化合物，丁基酜内酯(Butylphtha-lide)、丁烯基酜内酯(Butylidene phthalide)、藁本内酯(Ligustilide)、新蛇床内酯(Neocnidilide).洋川芎内酯(senkyunolide)A、B、C、E、F、I等；(4)有机酸，如阿魏酸(Ferulic acid)、瑟丹酸(Sedanonic acid)、叶酸(Folic acid)、香草酸(Vanillic acid)、咖啡酸(Caffeic acid)、原儿茶酸(Protocatechuic acid)、棕榈酸(Palmitic acid)、亚油酸(Linolenic acid)、4-羟基苯甲酸(4-Hydroxybenzoic acid)等；亦含苯酞类化合物4-羟基-3-丁基苯酞(4-Hydroxy-3-butylphthalide)以及苯酞衍生物，如川芎内酯(Cnidiumlactone)、川芎酚(Chuanxingol)等以及双苯酞衍生物。

川芎主要分布区域：四川、云南、贵州、广西、湖北、湖南、江西、浙江、江苏、陕西、甘肃等。功能与主治：活血行气，祛风止痛。用于胸痹心痛，胸胁刺痛，跌扑肿痛，月经不调，经闭痛经，癥瘕腹痛，头痛，风湿痹痛。

中国药典2010年版一部川芎项下收载了薄层色谱的方法以川芎对照药材和欧当归内酯A为参照物鉴别川芎药材；采用液相色谱法测定了川芎中成分阿魏酸的含量；川芎中所含有的成分主要是极性较小的萜类化合物，如单萜、倍半萜等，挥发油中主要即是该类成分，建立一种有效分离检识极性小、分子量小成分测试方法，以全面地评价川芎药材及挥发油包合物的质量。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种川芎挥发油包合物指纹图谱的测定方法，该方法可有效地监控川芎挥发油包合物药材的质量，保证其在临床或生产应用时的有效、安全和稳定。

本发明的一种川芎挥发油包合物指纹图谱的测定方法，包括：

(1)取川芎挥发油包合物，精密称定，加入无水乙醇，超声(40KHz～60KHz，250W)提取40～60min，提取液用无水硫酸钠处理并离心，滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；供试品前处理采用无水硫酸钠处理去除供试品中残存的水分，以保证测试的准确性；

(2)取洋川芎内酯A对照品，精密称定，加入甲醇制成对照品溶液；

(3)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入GC-MS测定，即得川芎挥发油包合物指纹图谱；其中，质谱条件：电离方式为标准EI源，电子能量为70eV，离子源温度为230℃，四级杆温度150℃，接口温度280℃，数据采集扫描模式全扫描，质量范围为：30～400amu；溶剂延迟4min；色谱条件：Agilent HP-5MS色谱柱；进样口温度为270℃，载气为氦气，柱流量为1.0ml·min^-1，升温程序为初始温度为50℃，保持4min，以4℃·min^-1的速度升温至130℃，保持20min，以20℃·min^-1的速度升温至290℃，后运行300℃，保持3min，进样体积为1μl。

所述步骤(1)中的川芎挥发油包合物的获取方式为：川芎经过水蒸气蒸馏法提取挥发油后，采用β环糊精进行包合或者川芎采用二氧化碳超临界提取油后，采用β环糊精进行包合。

所述步骤(1)中的川芎挥发油包合物与无水乙醇的比例为0.4g:30ml。

所述步骤(1)中的微孔滤膜的孔径为0.22μm。

所述步骤(2)中的甲醇的体积百分数为99.6％。