[发明专利]提取茶叶核酸的试剂及用该试剂提取茶叶核酸的提取方法

权利要求书

1.一种提取茶叶核酸的试剂，其特征在于，包括试剂A、试剂B、试剂C、试剂D；

其中，试剂A包括Tris、EDTA、3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸、十二烷基肌氨酸钠、β-巯基乙醇以及作为溶剂的水；其中Tris的浓度为5-10mM；EDTA的浓度为5-10mM；3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸的体积百分含量浓度为0.05％-0.2％、十二烷基肌氨酸钠体积百分含量浓度为0.05％-0.2％；β-巯基乙醇的体积百分含量浓度为0.1-0.5％；

试剂B包括水饱和酚、吡咯烷酮、乙醇；水饱和酚、吡咯烷酮、乙醇的体积比为(99-98):1:1；

试剂C包括氯仿和异戊醇；氯仿和异戊醇的体积比为25:1；

试剂D为无水乙醇。

2.根据权利要求1所述的提取茶叶核酸的试剂，其特征在于，所述试剂A的pH值为7.2-7.8。

3.根据权利要求1所述的提取茶叶核酸的试剂，其特征在于，所述试剂B的pH值为5-8。

4.根据权利要求1所述的提取茶叶核酸的试剂，其特征在于，所述试剂A按照如下方法制备：将十二烷基肌氨酸钠、β-巯基乙醇、Tris、EDTA、3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸和水混合，得到试剂A。

5.根据权利要求1所述的提取茶叶核酸的试剂，其特征在于，所述试剂B按照如下方法制备：将水饱和酚、乙醇、吡咯烷酮混合，得到试剂B。

6.根据权利要求1所述的提取茶叶核酸的试剂，其特征在于，

所述试剂C按照如下方法制备：将氯仿和异戊醇混合，得到试剂C。

7.一种茶叶核酸的提取方法，其特征在于，利用如权利要求1-6中任一项所述的提取茶叶核酸的试剂进行提取，包括如下步骤：

S1、茶叶的研磨：将茶叶磨碎得到茶叶粉末；

S2、去除茶叶的细胞壁，得到去细胞壁的茶叶裂解液：使用试剂A与茶叶粉末混匀，再加入试剂B，混匀，进行裂解反应，得到反应液；将反应液离心收集上层水相，即得到去除细胞壁的茶叶裂解液；

S3、纯化去细胞壁的茶叶裂解液：在去除细胞壁的茶叶裂解液中加入等体积的试剂C，进行纯化反应，得到纯化裂解液；

S4、得到茶叶的DNA和RNA：在纯化裂解液中加入等体积的试剂D，混匀，离心得到茶叶细胞内的DNA和RNA。

8.根据权利要求7所述的茶叶核酸的提取方法，其特征在于，所述茶叶、试剂A和试剂B的配比为1μg-1g：400μl：400μl。

9.根据权利要求7所述的茶叶核酸的提取方法，其特征在于，S2中所述的裂解反应时间为30-60min。

10.根据权利要求7所述的茶叶核酸的提取方法，其特征在于，S3中所述纯化反应温度为60-70℃。