[发明专利]一种牛奶多糖及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及多糖的提取与纯化，具体涉及一种从发酵奶中提取及纯化的牛奶多糖。

背景技术

随着科技的发展，人们对生活的质量要求越来越高，人们开始追求健康饮食。多糖对人体发挥重要作用且暂时没有发现副作用。从20世纪50年代末人们发现真菌多糖具有抗肿瘤活性以来，人们对多糖这类重要生命物质有了许多新的认识，多糖的应用已渗入到保健品，化妆品，食品，饲料等领域，从而使这一学科成为目前生命科学中最活跃的研究领域之一。

多糖（polysaccharide）是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式（C₆H₁₀O₅）_n表示。多糖不是一种纯粹的化学物质，而是聚合程度不同的物质的混合物。多糖类一般不溶于水，无甜味，不能形成结晶，无还原性和变旋现象。多糖在水解过程中，往往产生一系列的中间产物，最终完全水解得到单糖。

多糖化合物广泛存在于动物细胞膜和植物、微生物的细胞壁中，是由醛基和酮基通过苷键连接的高分子聚合物，也是构成生物的四大基本物质之一。从20世纪50年代末人们发现真菌多糖具有抗肿瘤活性以来，人们对多糖这类重要生命物质有了许多新的认识。

牛奶，最古老的天然饮料之一，被誉为“白色血液”，对人体的重要性可想而知。牛奶经过乳酸菌发酵后，由于乳酸菌代谢可以产生多糖类物质，所以经过发酵的酸奶其多糖含量会有所增加。研究表明多糖具有免疫调节，抗病毒和抗癌，降血糖和乳化等作用，较其他类的多糖品质更为优良，利用价值更高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从发酵奶中提取和纯化的牛奶多糖及其制备方法。

本发明所用的发酵奶原料是临沂格瑞食品有限公司生产的原味发酵奶。

本发明一种牛奶多糖，是从发酵奶中提取并分离纯化制得的，具体由如下制备方法制得：

（1）发酵奶预处理

采用超声波提取法对发酵奶进行预处理，真空过滤、浓缩得提取液；

 （2）牛奶多糖粗提取

采用氯化钠法分离纯化：在沸腾情况下，将（1）中所得提取液调节pH，加入氯化钠，搅拌，煮沸，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液；

（3）牛奶多糖的纯化

将（2）中经过脱蛋白与脱色处理的牛奶多糖配置成1%的多糖溶液，经DEAE-52纤维素柱层析，然后用NaCl进行洗脱，控制流速，用蒽酮-硫酸法进行追踪测定，再根据梯度洗脱曲线收集合并单一洗脱峰管，接着经Sephadex G-100凝胶柱层析，然后用NaCl进行洗脱，控制流速，用蒽酮-硫酸法进行追踪测定，最后根据梯度洗脱曲线收集合并单一洗脱峰管；    

（4）紫外光谱鉴定牛奶多糖纯度

    用分光光度计检测纯化出来的牛奶多糖在190-400nm范围内是否存在核酸、蛋白质吸收峰；测定牛奶多糖中是否含有核酸和蛋白质；

（5）蒽酮-硫酸法测定牛奶多糖的含量，即得。

所述步骤（1）中pH值调至9-10，加入氯化钠使浓度达到5%W/v，搅拌，煮沸30min。

所述牛奶多糖经离心分离得到沉淀物，真空干燥，呈固态浅棕色粉末状。

所述的牛奶多糖为片剂。

本发明牛奶多糖的制备方法，包括如下工艺步骤：

（1）发酵奶预处理

采用超声波提取法对发酵奶进行预处理，真空过滤、浓缩得提取液；

 （2）牛奶多糖粗提取

采用氯化钠法分离纯化：在沸腾情况下，将（1）中所得提取液调节pH，加入氯化钠，搅拌，煮沸，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液；

（3）牛奶多糖的纯化

将（2）中经过脱蛋白与脱色处理的牛奶多糖配置成1%的多糖溶液，经DEAE-52纤维素柱层析，然后用NaCl进行洗脱，控制流速，用蒽酮-硫酸法进行追踪测定，再根据梯度洗脱曲线收集合并单一洗脱峰管，接着经Sephadex G-100凝胶柱层析，然后用NaCl进行洗脱，控制流速，用蒽酮-硫酸法进行追踪测定，最后根据梯度洗脱曲线收集合并单一洗脱峰管；    

（4）紫外光谱鉴定牛奶多糖纯度

    用分光光度计检测纯化出来的牛奶多糖在190-400nm范围内是否存在核酸、蛋白质吸收峰；测定牛奶多糖中是否含有核酸和蛋白质；

（5）蒽酮-硫酸法测定牛奶多糖的含量，即得。