[发明专利]一种预示和鉴定鸡腹部脂肪量的分子标记方法及应用

权利要求书

1.一种预示和鉴定鸡腹部脂肪量的分子标记方法，其特征在于，根据鸡蛋白前体加工酶1基因SNP位点g.28897G>A和g.29161C>T上下游250bp序列设计引物，再根据所得引物进行鸡基因组DNA的PCR扩增，之后利用限制性内切酶对扩增产物进行酶切，再对酶切产物进行电泳分离，最后利用限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术分析基因多态性，获得鸡腹脂标记基因型；

所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.4所示。

2.权利要求1所述方法，其特征在于，所述鸡腹部脂肪量，是指鸡的腹脂重和腹脂率。

3.权利要求1所述方法，其特征在于，步骤如下：

1)根据鸡蛋白前体加工酶1基因SNP位点g.28897G>A和g.29161C>T上下游250bp序列设计引物，获得扩增引物；

2)利用步骤1)所得的扩增引物进行鸡基因组DNA的PCR扩增，获得扩增产物；

3)利用限制性内切酶对步骤2)所得的扩增产物进行酶切，获得酶切产物；

4)利用琼脂糖凝胶对步骤3)所得的酶切产物进行电泳分离，获得分离产物；

5)利用限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术对步骤4)所得的分离产物进行基因型分析，获得鸡腹脂标记基因型。

4.权利要求3所述方法，其特征在于，步骤1)所述扩增引物，核苷酸序列如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.4所示。

5.权利要求3所述方法，其特征在于，步骤3)所述限制性内切酶，是限制性内切酶HPY188I和HinfI。

6.权利要求3所述方法，其特征在于，步骤4)所述琼脂糖凝胶，琼脂糖凝胶的浓度为1.5％。

7.权利要求3所述方法，其特征在于，步骤5)所述基因型分析，分析的部位是鸡蛋白前体加工酶1基因的3’UTR区。

8.权利要求7所述方法，其特征在于，所述分析的部位，分析的位点是SEQ ID NO.5所示鸡蛋白前体加工酶1基因序列的第57位和第321位的碱基的替换突变。

9.权利要求3所述方法，其特征在于，步骤5)所述鸡腹脂标记基因型，当鸡蛋白前体加工酶1基因位点g.28897G>A为G碱基时，酶切产物琼脂糖凝胶电泳条带大小为282bp，将其命名为GG基因型；当鸡蛋白前体加工酶1基因位点g.28897G>A为A碱基时，酶切产物琼脂糖凝胶电泳条带大小为565bp，将其命名为AA基因型；该位点杂合的个体酶切产物琼脂糖凝胶电泳条带为两条，大小分别为282bp和565bp，将其命名为AG基因型；当鸡蛋白前体加工酶1基因位点g.29161C>T为C碱基时，酶切产物琼脂糖凝胶电泳条带大小为253bp，将其命名为CC基因型；当鸡蛋白前体加工酶1基因位点g.29161C>T为T碱基时，酶切产物琼脂糖 凝胶电泳条带大小为506bp，将其命名为TT基因型；该位点杂合的个体酶切产物琼脂糖凝胶电泳条带为两条，大小分别为203bp和506bp，将其命名为CT基因型。

10.权利要求1-9所述方法，其特征在于，用于鸡的遗传育种。