[发明专利]一种免疫层析检测方法及试纸

说明书

技术领域

本发明属于体外诊断试剂领域，具体涉及一种免疫层析检测方法以及所使用的试纸和试纸盒。

背景技术

免疫层析法是九十年代兴起的一种基于免疫胶体金技术的快速诊断技术，其原理是将特异性的抗体先固定于反应膜2上，当试纸的样本垫4浸入待检样本后，由于毛细管作用，待检样本将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗体的区域时，待检样本中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合，若用免疫胶体金可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。

以胶体金试纸为主要代表的免疫层析检测技术现已广泛用于免疫检测的各个方面，该技术主要是将特异性的抗体或抗原以条带状固定在反应膜2上，通过一条试纸条的显色结果进行分析，或者将多条试纸条置于不同的卡槽内进行分析，尚未发现由二条或多条单个免疫层析检测试纸条无间隔组合固定在一起，相邻的单个免疫层析检测试纸条的检测块6不在反应膜2的同一水平位置的免疫层析检测方法及试纸。

申请号为CN200720005145的专利公开了一种内分泌激素四合一联合检测板，该检测板板身内部设有4个与检测试纸对应的凹槽，检测试纸4条固定于板身内部。该方法通过凹槽隔开不同的检测试纸，避免试纸之间的显色干扰。

目前，试纸由二条或多条单个免疫层析检测试纸条无间隔组合固定在一起，相当于将特异性抗体或抗原以二个或多个四边形状组合固定于反应膜2上；检测区T采用四边形状图形作为检测块6，且检测块6的设定可以是同浓度或者不同浓度的同一种抗体或抗原，也可以是同浓度或者不同浓度的多种抗体或抗原。通过肉眼观察多个检测块6和质控块7的显色情况进行定性、半定量检测或采用具有信号检测功能的仪器采集试纸上检测块6和质控块7的特征信号进行定量检测的免疫层析检测方法及试纸从未有报道过。

免疫层析技术包括但不限于双抗体夹心法、间接法、竞争抑制法。

双抗体夹心法，属于非竞争结合测定，适用于检测分子中具有至少两个抗原决定簇的多价抗原。其基本工作原理是：利用连接于反应膜2上的抗体和标记抗体分别与待检样本中被检测抗原分子上两个抗原决定簇结合，形成标记抗体-抗原-固相抗体免疫复合物。

间接法，测定抗体最常用的方法，属非竞争结合测定。其原理是将抗原固化于反应膜2，待检样本中待测抗体首先与标记分子结合，形成复合物，再与反应膜2上的抗原结合，形成标记分子-待检抗体-抗原复合物。

竞争法可用于抗原和抗体测定。以测定抗原为例，其基本原理是待检样本中的受检抗原和固相的包被抗原竞争与标记抗体结合，当待检样本中的受检抗原的量大于试剂的阈值，标记抗体则不会与固相的包被抗原结合；若待检样本中无受检抗原，标记抗体直接与固相的包被抗原结合。

免疫层析检测方法的测定方法包括用肉眼观察确定检测区T的检测线8颜色的定性方法、用肉眼观察检测区T的多个检测线8显色情况的半定量方法和采用具有信号检测功能的仪器采集试纸上检测线8的特征信号进行定量方法。

发明内容

本发明的目的在于，针对现有技术，提供一种免疫层析检测方法及试纸，可实现对待检样本的定性、半定量或定量检测。

一种免疫层析检测方法，采用如下步骤：

（1）反应膜2包被：根据待检样本中的待检目标物确定包被抗体或抗原的种类，设定检测块6及质控块7的浓度和数量；

（2）根据待检样本中的待检目标物制备结合物释放垫5；

（3） 样本垫4制备；

（4）组装单个免疫层析检测试纸条：试纸条由底板1，及依次设置在底板1上的样本垫4、结合物释放垫5、反应膜2、吸收垫3构成；

（5）组装免疫层析检测试纸：试纸是由二条或多条单个免疫层析检测试纸条无间隔组合固定在一起，相当于将特异性抗体或抗原以二个或多个四边形状组合固定于反应膜2上；

（6）对待检样本进行检测：在试纸样本垫4中加入待检样本，通过肉眼观察多个检测块6和质控块7的显色情况对待检样本进行定性或者半定量检测，或采用具有信号检测功能的仪器采集试纸上检测块6和质控块7的特征信号进行定量检测。或者首先根据多个检测块6的显色情况确定待检样本中的待检目标物，再通过肉眼观察多个检测块6和质控块7的显色情况对待检样本中不同的待检目标物进行定性或者半定量检测，或采用具有信号检测功能的仪器采集试纸上检测块6和质控块7的特征信号进行定量检测。