[发明专利]一种番茄溃疡病菌快速检测的方法及其专用引物有效
| 申请号： | 201410823689.8 | 申请日： | 2014-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN104651490A | 公开（公告）日： | 2015-05-27 |
| 发明（设计）人： | 张娜;杨文香;赵赛;刘大群 | 申请（专利权）人： | 河北农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 无 | 代理人： | 无 |
| 地址： | 071001 *** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 番茄 溃疡 病菌 快速 检测 方法 及其 专用 引物 | ||
【权利要求书】：
1.一组番茄溃疡病菌快速检测的专用引物，其特征在于，是由序列表中的序列1、序列2、序列3和序列4的核苷酸序列组成的引物组。
2.一种番茄溃疡病菌快速检测的的方法，其特征在于，是以番茄溃疡病菌标准菌株DNA为模板，在由权利要求1所述的序列表中序列1、序列2、序列3和序列4的核苷酸序列组成的引物组的引导下进行恒温PCR扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测在100bp-1000bp之间有梯度条带。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，25 μL总体系中含模板DNA 2 μL，Betaine甜菜碱0.4 mol/L，MgSO4 2.0 mmol/L，Bst DNA聚合酶4U，dNTPs 1.0 mmol/L，引物1、引物2各1.5 μL，引物3、引物4各0.5 μL，1×Isothermal Amplification Buffer，其余用无菌蒸馏水补充反应体系至25.0 μL，反应程序为：65℃温育40 min，80℃灭活10 min。
4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，检测扩增产物的方法可为对扩增产物进行1.5 %琼脂糖凝胶电泳，然后用Goldview显色。
5.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，检测扩增产物的方法可为在扩增产物中按1/100的比例加入用10×TBE稀释的SYBR Green I 染料。
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