[发明专利]一种定量检测试纸条及其检测用标准曲线制定方法、检测方法和应用

权利要求书

1.一种定量检测试纸条检测用标准曲线制定方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）准备至少7份相邻浓度间相差0.5-20倍的待测样本；

（2）应用所述的试纸条，对待测样本进行加样检测，各层析反应10-30min；

（3）检测并记录完成步骤（2）的各上样试纸条检测线和质控线上标记物信号值；将检测线的信号值记录为Tn，n为试纸条上检测线的编号，将质控线的信号值记录为C；

（4）计算各上样试纸条的Tn之和与C的比值；

（5）以Tn之和与C的比值为纵坐标，以信号值对应的样本浓度值为横坐标，绘制所述Tn之和与C的比值与所述样本浓度值的关系曲线图，即得检测用标准曲线；

所述试纸条包括底衬（3）以及设在底衬（3）上并顺次搭接粘贴的样品垫（1）、标记垫（2）、硝酸纤维素膜（4）和吸水纸（7），所述硝酸纤维素膜（4）上设有2条检测线和一条质控线（5）；上样检测时，所述的检测线和质控线（5）上的包被物同时结合标记垫（2）上的同一标记物；

所述硝酸纤维素膜（4）上包被有第一检测线（61）和第二检测线（62），所述试纸条的第一检测线（61）与第二检测线（62）之间的距离为3-8mm，所述试纸条的第二检测线（62）与质控线（5）之间的距离为3-8mm；

所述标记垫（2）上涂覆有与待测样本对应，并与其发生抗原抗体反应的标记抗体或抗原，所述标记垫（2）上的标记抗体或抗原浓度为5-80%；

所述标记垫（2）上的标记抗体或抗原为胶体金、量子点或乳胶标记抗体或抗原；

所述检测线上均包被有与待测样本发生抗原抗体反应的相应抗体或抗原；

所述检测线上的抗体或抗原浓度为0.18-1.8mg/mL，所述检测线上的抗体或抗原包被参数为0.15-0.25μL/cm；

所述质控线（5）上包被有与标记垫（2）上的标记抗体或抗原发生抗原抗体结合反应的相应抗原或抗体；

所述质控线（5）上的抗原或抗体浓度为1-5mg/mL；包被参数为0.15-0.2μL/cm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标记垫（2）上的标记抗体为胶体金标记鼠抗β-HCG单克隆抗体或荧光胶乳标记鼠抗β-HCG单克隆抗体。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标记垫（2）上的标记抗体或抗原浓度为10-60%。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测线上均包被有鼠抗α-HCG单克隆抗体。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测线上的抗体或抗原浓度为0.2-1.8mg/mL。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测线上的抗体或抗原包被参数为0.15-0.2μL/cm。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述质控线（5）上包被有抗鼠IgG抗体、抗兔IgG抗体或抗鸡IgG抗体。

8.一种定量检测试纸条的检测方法，其特征在于，采用如权利要求1、3、5、6、7中任意一种所述方法制定出来的标准曲线，所述检测方法包括如下步骤：

（1）将待测样品添加到试纸条加样区，免疫层析反应10-30min；

（2）将完成步骤（1）的试纸条插入预设有如权利要求1、3、5、6、7中任意一种所述方法制定的标准曲线的相应定量检测仪中，等待检测仪分析计算；

（3）输出检测结果。

9.根据权利要求8所述的方法在检测生物大分子和/或小分子中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的试纸条在检测蛋白中的应用。

11.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的试纸条在检测HCG中的应用。