[发明专利]山羊LYRM1基因单核苷酸多态性位点的检测方法及检测试剂盒有效
| 申请号: | 201410812129.2 | 申请日: | 2014-12-22 |
| 公开(公告)号: | CN104450933B | 公开(公告)日: | 2018-02-16 |
| 发明(设计)人: | 房兴堂;陈宏;刘宣宣;张春雷;金晶;王艳红 | 申请(专利权)人: | 江苏师范大学 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司61200 | 代理人: | 陆万寿 |
| 地址: | 221116 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 山羊 lyrm1 基因 核苷酸 多态性 检测 方法 试剂盒 | ||
1.山羊LYRM1基因单核苷酸多态性位点的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)以待测山羊全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增山羊LYRM1基因部分序列;
所述的引物对P为:
上游引物:5’ACAGGCTTAGTTGCTCCC 3’
下游引物:5’TTCAGTCTTCTGCCCACA 3’
以上述引物对扩增了山羊LYRM1基因第3外显子部分区域及一部分内含子区域;
(2)对PCR扩增产物进行SSCP检测:PCR扩增产物经变性剂变性处理后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,然后根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果结合测序判定多态性位点的基因型,所述多态性位点为:
在山羊的LYRM1基因第8793位为G或T的碱基多态性位点,表现为GG、GT以及TT三种基因型;基因型TT的体高显著高于另外两种基因型GG、GT,应当选择山羊LYRM1基因突变的个体,即TT基因型的个体,加快具有优质经济性状山羊种群的建立。
2.如权利要求1所述的山羊LYRM1基因单核苷酸多态性位点的检测方法,其特征在于:所述的PCR扩增的反应程序为:94℃预变性4min;94℃变性45s,58℃退火50s,72℃延伸1min,32个循环;最后72℃延伸10min。
3.如权利要求1所述的山羊LYRM1基因单核苷酸多态性位点的检测方法,其特征在于:所述聚丙烯酰胺凝胶电泳采用10%的聚丙烯酰胺凝胶。
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