[发明专利]一种白术提取物及其指纹图谱检测方法

说明书

技术领域

 本发明属于中药分析领域，具体涉及中药白术提取物的制备，并通过中药指纹图谱方法对白术提取物进行质量检测和控制。

背景技术

 中药中含有多种化学成分，并被同时服用到体内，产生治疗作用，由于提取物中成分复杂，为了实现质量控制的目的，还需要科学有效的检测方法对中药含有的化学成分进行全面检测。

指纹图谱技术是一种成熟的中药成分检测方法，在中药等植物药质量控制中的应用，已成为国内外公认的最有效手段之一，因此，采用HPLC指纹图谱对中药提取物进行质量控制，是国内外认可、技术合理的有效质量控制手段。

   白术为菊科植物白术的干燥根茎，冬季下部叶枯黄、上部叶变脆时采挖，除去泥沙，烘干或晒干，再除去须根，可用于治疗脾虚食少、腹胀泄泻、痰饮眩悸、水肿、自汗、胎动不安等症，有健脾益气、燥湿利水、止汗、安胎等功效。这些功效与作用和白术中的化学成分密切相关；此外，《中国药典》（2010版一部）中尚未收录与白术有关的液相分析方法，因此，凭借高效液相色谱指纹图谱对白术提取物进行质量分析与控制，是一种创新性的检测和指控方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种白术提取物的制备方法，并建立运用HPLC指纹图谱的方法对其进行检测和质量控制。

为此，本发明提供了一种制备白术提取物的方法，其包括以下步骤：取白术饮片20-50g，以煎煮的方式进行提取，一煎加入饮片重量8-12倍的水，煎煮提取30-90分钟，二煎加入饮片重量6-10倍的水，煎煮提取20-60分钟，合并两次滤液，浓缩、干燥，即得白术提取物。

  本发明还提供了用指纹图谱的方法检测白术提取物的方法，该方法包括如下步骤：

(a)精密称取白术提取物1-3g，以15-25倍体积的甲醇为溶剂，采用超声或加热回流或冷浸振摇的提取方法，提取30-60min，过滤、浓缩，加甲醇定容至10ml，经0.22μm或0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液作为供试品溶液。

 (b)高效液相色谱条件为：色谱柱为ODS（C₁₈）色谱柱，流动相为乙腈-水；流速0.8-1.2ml/min；采用190-400nm波长紫外检测记录每一波长下成分响应值的方式检测；梯度洗脱方式为：                                               

(c)吸取步骤(a)的供试品溶液5-20ul，将其注入高效液相色谱仪中，照(b)项所述色谱条件进行洗脱，得到供试品HPLC图。

根据本发明提供的用指纹图谱的方法检测白术提取物的方法，C₁₈色谱柱为Inertsil ODS-SP C₁₈色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm；流动相的流速为1ml/min；检测波长为248nm；色谱柱的柱温为25℃。

其中步骤(c)中获得3个主要色谱峰，所述3个主要色谱峰的保留时间分别为27.031min、31.507min和37.105min。

本发明具有如下优点和用途：

(1)本发明通过两次煎煮提取的方式，使得白术中的有效成分能够充分溶出，从而保证了白术提取物中含有更多的有效成分。

(2)本发明通过国内外认可、技术合理的HPLC色谱指纹图谱的方法对白术提取物进行整体质量控制。

(3)本发明针对目前白术提取物检测手段较少的现状，提供了一种新的白术提取物的检测方法。

附图说明

图1为本发明提供的白术提取物液相指纹图谱，并将保留时间为27.031min、31.507min、37.105min处出现的三个色谱峰作为主要色谱峰。

图2为采取超声、加热回流、冷浸振摇等不同提取方法所得白术提取物的液相图谱。

图3为以超声的方法对白术提取物进行提取，在30、45、60min等不同提取时间所得白术提取物的液相图谱。

具体实施方式

下面通过具体的实施例/实验例进一步说明本发明， 本发明的优选实施例如下：

实施例1：

(1)仪器和药品：岛津LC-2010A HT高效液相色谱仪；电子万用炉；煎药用砂锅；电子恒温水浴锅；白术饮片；其他试剂为色谱纯或分析纯。

(2)白术提取物的制备：称取白术饮片50g，置于砂锅中，以煎煮的方式进行提取；一煎加水500ml，煎煮30min；二煎加水400ml，煎煮20min；合并两次提取液，对提取液进行浓缩、干燥，得到白术提取物。