[发明专利]一种多肽菌素、其制备方法及其应用

权利要求书

1.一种多肽菌素，其特征在于，所述肽的氨基酸序列为Gly-Lys-Ser-Gln-Glu-Tyr-Leu-Gly。

2.权利要求1所述的多肽菌素的制备方法，其特征在于，所述方法包括根据Fmoc-固相多肽合成法合成粗品多肽，优选的是，所述方法还包括使用反相高效液相色谱对所述粗品多肽进行纯化。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述Fmoc-固相多肽合成法中，以二氯树脂为固相载体，HOBt(1-羟基-苯并-三氮唑)/TBTU(苯并三唑四甲基四氟硼酸)/DIEA(N,N'-二异丙基乙胺))为催化剂，二甲基甲酰胺DMF为溶剂和清洗剂，三氟乙酸(TFA)/1,2-乙二硫醇(EDT)/H2O为切割剂，进行所述粗品多肽的合成。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，在合成时，所述方法使用分别使用下述氨基酸进行合成：Gly:Fmoc-Gly-OH

Lys:Fmoc-Lys(Boc)-OH

Ser:Fmoc-Ser(tBu)-OH

Gln:Fmoc-Gln(Trt)-OH

Glu:Fmoc-Glu(OtBu)-OH

Tyr:Fmoc-Tyr(Tbu)-OH

Leu:Fmoc-Leu-OH。

5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述Fmoc-固相多肽合成的步骤包括：

a.用二甲基甲酰胺(DMF)浸泡所述二氯树脂以将其活化；

b.根据Fmoc-固相多肽合成法，以二氯树脂为固相载体，DIEA为催化剂，DMF为溶剂，连接第一个氨基酸到树脂；

c.用哌啶脱去Fmoc-基团，使第一个氨基酸的氨基游离出来，恢复反应活性；

d.可选地对树脂进行茚三酮显色检测，以鉴别Fmoc-基团是否脱除以及氨基酸的连接是否完全；

e.洗涤后用以HOBT/TBTU/DIEA为催化剂，DMF为溶剂及清洗剂，连接第二个氨基酸；

f.以同样方法连接其他的氨基酸；可选的是连接完每个氨基酸后都进行茚三酮显色检测，并且结果呈阴性时才可进行下步反应；

g.连接完所有氨基酸后洗涤，并用氮气将树脂吹干；

h.用切割试剂将肽从树脂上切割下来；

i.将切下的肽再在冷乙醚中沉淀、洗涤、离心；

j.冻干机中冻干获得粗品。

6.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述反相高效液相色谱条件为：

多肽菌素纯化条件为：以水-乙腈为二元梯度洗脱流动相。流动相A为0.1％三氟乙酸的水溶液，流动相B为0.1％三氟乙酸的乙腈溶液，色谱柱为C18反相色谱柱，50*250mm，紫外检测波长215nm，流速10ml/min，进样量10ml；

洗脱梯度：

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述粗品多肽的纯度为85％以上，优选87％以上，并且所述反相高效液相色谱纯化后的产品的纯度为98％以上。

8.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述切割试剂的体积比为TFA：EDT：H₂O＝95:2.5:2.5。

9.权利要求1所述的多肽菌素在制备用于免疫提高促进、细胞组织修复和/或抗菌促生长的药物中的应用。

10.权利要求1所述的多肽菌素在制备用于畜禽养殖的抗生素替代品中的应用。