[发明专利]一种中药组合物的指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种中药组合物的指纹图谱建立方法，所述中药组合物的原料组成为：陈皮、前胡、瓜蒌仁、半夏、紫菀、桑白皮、紫苏子、苦杏仁、款冬花、鱼腥草、茯苓和甘草，通过本领域常用的方法，与药学上可以接受的辅料，制备成临床上可以接受的制剂；所述方法包括采用高效液相色谱法检测所述中药组合物中各类化合物的保留时间，其中所述高效液相色谱的条件如下：

色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；

流动相为体积比为5:95～95:5的乙腈和重量百分浓度0.1％的磷酸水溶液组成的梯度洗脱系统，流速为0.5～1.5mL/min，优选为1ml/min

柱温为25～40℃，优选为30℃；

紫外检测波长为225nm。

2.根据权利要求1所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，所述方法的流动相梯度洗脱条件为：

0～50min，乙腈的体积百分比为5％→30％，所述0.1％磷酸水溶液的体积百分比为95％→70％；

50～120min，乙腈的体积百分比为30％→95％，所述0.1％磷酸水溶液的体积百分比为70％→5％。

3.根据权利要求1或2所述的指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述方法包括通过以下方法制备供试品溶液：取所述中药组合物3g，粉碎，精密称定，置于50ml的锥形瓶中，精密加25ml甲醇，超声30min后，放冷至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

4.根据权利要求1所述的指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述方法具体的操作步骤包括：

1)供试品溶液的制备：取咳喘顺丸3g，粉碎，精密称定，置于50ml的锥形瓶中，精密加25ml甲醇，超声30min后，放冷至室温，既得；

2)测定：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，根据以下色谱条件进行测定，得到指纹图谱：

色谱柱：Agilent SB-C18，250×4.6mm，固定相平均粒径5μm；

流动相：体积比为5:95～95:5的乙腈和体积百分浓度0.1％的磷酸水溶液，按照如下程序进行梯度洗脱：

0～50min，乙腈的体积百分比为5％→30％，所述0.1％磷酸水溶液的体积百分比为95％→70％；

50～120min，乙腈的体积百分比为30％→95％，所述0.1％磷酸水溶液的体积百分比为70％→5％；

流速：1.0mL/min；

柱温：30℃；

紫外检测波长：225nm。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述方法建立的指纹图谱，特征峰包括橙皮苷吸收峰，并以橙皮苷吸收峰为参照；

优选的，所述特征峰还包括苦杏仁苷吸收峰、白花前胡甲素吸收峰或白花前胡乙素吸收峰中的一个或多个，相对保留时间分别为：

苦杏仁苷吸收峰：0.436±0.159％；白花前胡甲素吸收峰：1.917±0.027％；白花前胡乙素吸收峰：2.143±0.026％。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述的中药组合物，原料由如下重量份的药材组成：紫苏子120重量份，瓜蒌仁180重量份，茯苓150重量份，鱼腥草300重量份，苦杏仁90重量份，制半夏100重量份，款冬花120重量份，桑白皮150重量份，前胡120重量份，紫菀120重量份，陈皮50重量份，甘草100重量份。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述中药组合物为丸剂，更优选为咳喘顺丸，通过如下方法制备：

1)准备如下重量份的药材：紫苏子120重量份，瓜蒌仁180重量份，茯苓150重量份，鱼腥草300重量份，苦杏仁90重量份，制半夏100重量份，款冬花120重量份，桑白皮150重量份，前胡120重量份，紫菀120重量份，陈皮50重量份，甘草100重量份；

2)以上十二味，紫苏子、前胡、半夏、茯苓、陈皮、苦杏仁、款冬花粉碎成粗粉，其余瓜蒌仁等五味加水煎煮二次，滤过，滤液合并，浓缩成稠膏，加入上述粗粉，干燥，粉碎成细粉，混匀，每100重量份粉末加炼蜜30～40重量份与水适量，泛丸，干燥，用活性炭包衣，干燥，即得。