[发明专利]检测犬细小病毒IgG抗体的ELISA试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.检测犬细小病毒IgG抗体的ELISA试剂盒，其特征在于，检测犬瘟热病毒IgG抗体的ELISA试剂盒，其特征在于：所述ELISA检测试剂盒以重组P45蛋白为包被抗原，封闭后加入样本及标准阳性对照、阴性对照，以酶标兔抗犬IgG多克隆抗体为标记抗体，借助该酶标记抗体，建立间接ELISA法检测检测犬细小病毒IgG类型抗体，然后加入辣根过氧化物酶底物TMB显色，终止液终止反应，测定各孔吸光度值。

2.根据权利要求1所述的检测犬细小病毒IgG抗体的ELISA试剂盒，其特征在于：

还包括ELISA板条、血清稀释液和浓缩洗涤液、底物显色液、酶标单克隆抗体、终止液、阳性对照、阴性对照。

3.根据权利要求2所述的检测犬细小病毒IgG抗体的ELISA试剂盒，其特征在于：

所述ELISA板条：每个试剂盒装有1块96孔ELISA微孔板，每块ELISA板条为能自行拆卸的已包被P45蛋白的ELISA微孔板，规格为8孔×12条；

所述血清稀释液为即用型的牛血清白蛋白溶液；

所述洗涤液为25倍浓缩的磷酸盐缓冲液，使用前稀释；

所述底物显色液：即用型TMB显色液，10mL；

所述终止液：2mol/L的H₂SO₄溶液，10mL；

所述酶标单克隆抗体：所述辣根过氧化物酶标记的兔抗犬IgG多克隆抗体，使用前100倍稀释；

阳性对照为：经高温灭活的经疫苗免疫后犬血清稀释液。

阴性对照为：经高温灭活的未患病且未经疫苗免疫的犬血清稀释液。

4.制备权利要求1所述的检测犬细小病毒IgG抗体的ELISA试剂盒，其特征在于：所述辣根过氧化物酶标记的兔抗犬IgG多克隆抗体的方法，采用辛酸-硫酸铵法纯化犬血清IgG，制备纯化的犬IgG，并用此纯化IgG免疫家兔，制备兔抗犬IgG多克隆抗体；采用过碘酸钠法对上述多克隆抗体进行辣根过氧化物酶标记。

5.制备权利要求1所述的检测犬细小病毒IgG抗体的ELISA试剂盒，其特征在于：所述重组P45蛋白是采用基因重组技术，体外诱导表达、纯化蛋白的方式获得。

6.权利要求1所述的检测犬细小病毒IgG抗体的ELISA试剂盒在检测犬细小病毒IgG类型抗体中的应用。