[发明专利]一种利用HPLC法检测单氰胺的定量方法

说明书

技术领域

本发明属于分析技术领域，涉及单氰胺的定量分析方法，具体涉及利用HPLC法检测单氰胺的定量方法。

背景技术

晶体单氰胺(Cyanamide，CN₂H₂)不稳定，呈菱形，无色，易潮解，熔点为46℃。单氰胺在水中有很高的溶解度且呈弱碱性，在43℃时与水完全互溶。单氰胺含有氰基和氨基，都是活性基团，具有上述官能团的多重反应性能，易发生加成、取代、缩合等反应。

国外单氰胺的工业化生产始于上世纪30年代末，由氰胺化钙与酸作用而得，以后逐渐演变为氰胺化钙、CO₂、水原料工艺路线。现代工业商品单氰胺均采用此原料工艺路线生产，但是在生产过程中有副产物双氰胺、尿素和硫脲等产生，所以需要对单氰胺进行定量检测。

文献报道，单氰胺类物质的检测主要有化学分析法、电位滴定法、离子色谱法等。其中化学分析法、电位滴定法虽然比较简单，但是耗时较长，人为误差较大。另外有文献报道的单氰胺的检测方法有柱前衍生后利用荧光检测器进行检测，该方法比较费时，而且荧光检测器也比较稀少，价格也不菲。

发明内容

针对现有技术的不足，我们通过优化条件，例如色谱柱(耐水柱)、流动相、柱温、波长的选择等，提供了一种利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，该方法精密度高，重现性好，准确度高，重复性好，能够实现对样品的直接检测，大大减少分析时间，而且方法简单易行，方便可靠。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案为：

一种利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，以单氰胺标准物质做标样，以双氰胺为内标物，溶剂溶解样品，采用高效液相色谱仪测试。

一种利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，以单氰胺标准物质做标样，以双氰胺为内标物，溶剂溶解样品，采用高效液相色谱仪测试，具体步骤如下：

(1)配制单氰胺和双氰胺标准储备溶液；

(2)对步骤(1)配制的单氰胺标准储备溶液进行稀释，配制单氰胺标准溶液A、B、C、D、E，然后分别向单氰胺标准溶液A、B、C、D、E中加入等量的步骤(1)配制的双氰胺标准储备溶液，利用高效液相色谱仪进样分析，并同时记录单氰胺和双氰胺的峰面积；采用内标法绘制单氰胺和双氰胺的浓度比-峰面积比标准曲线，得出标准曲线的回归方程：

y＝0.105x+0.0052，R²＝0.9998，式中y为单、双氰胺的峰面积比，x为单、双氰胺的浓度比，R为线性相关系数；

(3)配制单氰胺样品溶液，并加入一定量的双氰胺标准储备溶液作为内标物，利用高效液相色谱仪进样分析，并同时记录峰面积，根据步骤(2)的标准曲线回归方程计算得出单氰胺的含量。

因为工业生产中，需要同时检测单氢胺和双氢胺的含量，一般地先用外标法测出双氰胺的含量，再以双氰胺这个已知的量为内标物，去检测单氰胺的含量，但是由于该方法只是介绍单氰胺，就把外标法测双氰胺含量的步骤省去，直接写成配置的浓度相当的双氰胺标准储备液。

一种利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，所述的高效液相色谱仪为岛津高效液相色谱仪SPD-20A；所述的分离色谱柱选自Hypersil BDS、Hypersil ODS、LiChrosorb、SHIMADZU VP-ODS、Inertsil ODS-SP、Extend-C18、ZORBAX ODS、ZORBAX SB-C18、LiChrosorb C18、Hypersil ODS中的一种，且柱长为150mm，柱内径为5um。

一种利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，所述的色谱条件为柱温为20-30℃，采用可变波长紫外吸收检测器，检测波长为240nm，以5％甲醇水溶液为流动相，流速为0.3-0.5ml/min，进样的样品体积为20μL。

优选的分离色谱柱选自Inertsil ODS-SP色谱柱，在其它条件完全相同的条件下进样，发现以Inertsil ODS-SP为固定相的色谱柱对于单氰胺具有良好的选择性，能够将单氰胺与其他杂质如双氰胺、硫脲等完全分离。

优选的色谱条件为柱温为30℃，若温度过高(>40℃)，单氰胺容易分解产生尿素，所以优选为30℃，在这样的温度范围内，在其它条件完全相同的条件下进样，对样品的分离度，峰形，对称度等方面的影响较小，单氰胺样品均能实现良好的分离。

优选的流动相的流速为0.3ml/min，在这样的流速范围内，在其它条件完全相同的条件下进样，对样品的分离度，峰形，对称度等方面的影响较小，单氰胺样品均能实现良好的分离。