[发明专利]一种利用HPLC法检测单氰胺的定量方法

权利要求书

1.一种利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，其特征在于：以单氰胺标准物质做标样，以双氰胺为内标物，溶剂溶解样品，采用高效液相色谱仪测试。

2.如权利要求1所述的利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，其特征在于：以单氰胺标准物质做标样，以双氰胺为内标物，溶剂溶解样品，采用高效液相色谱仪测试，具体步骤如下：

(1)配制单氰胺和双氰胺标准储备溶液；

(2)对步骤(1)配制的单氰胺标准储备溶液进行稀释，配制不同浓度的单氰胺标准溶液A、B、C、D、E，然后分别向单氰胺标准溶液A、B、C、D、E中加入等量的步骤(1)配制的双氰胺标准储备溶液，利用高效液相色谱仪进样分析，并同时记录单氰胺和双氰胺的峰面积；采用内标法绘制单氰胺和双氰胺的浓度比-峰面积比标准曲线，得出标准曲线的回归方程:

y＝0.105x+0.0052，R²＝0.9998，式中y为单、双氰胺的峰面积比，x为单、双氰胺的浓度比，R为线性相关系数；

(3)配制单氰胺样品溶液，并加入步骤(1)配制的双氰胺标准储备溶液作为内标物，利用高效液相色谱仪进样分析，并同时记录峰面积，根据步骤(2)的标准曲线回归方程计算得出单氰胺的含量。

3.如权利要求1所述的利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，其特征在于：所述的高效液相色谱仪为岛津高效液相色谱仪SPD-20A；所述的分离色谱柱选自Hypersil BDS、Hypersil ODS、LiChrosorb、SHIMADZU VP-ODS、Inertsil ODS-SP、Extend-C18、ZORBAX ODS、ZORBAX SB-C18、LiChrosorb C18、Hypersil ODS中的一种，且柱长为150mm，柱内径为5um。

4.如权利要求1所述的利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，其特征在于：所述的色谱条件为柱温为20-30℃，采用可变波长紫外吸收检测器，检测波长为240nm，以5％甲醇水溶液为流动相，流速为0.3-0.5ml/min，进样的样品体积为20μL。

5.如权利要求3所述的利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，其特征在于：所述的分离色谱柱选自Inertsil ODS-SP色谱柱。

6.如权利要求4所述的利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，其特征在于：所述的色谱条件为柱温为30℃。

7.如权利要求4所述的利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，其特征在于：流动相的流速为0.3ml/min。

8.如权利要求2所述的利用HPLC法检测单氰胺的定量方法，其特征在于：配制单氰胺、双氰胺标准储备溶液时所用的溶剂为甲醇与水的混合溶液，且两者的体积比为1：20。