[发明专利]米诺地尔人工抗原、其多克隆抗体及其制备方法和应用在审
申请号: | 201410742420.7 | 申请日: | 2014-12-05 |
公开(公告)号: | CN104530220A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 张癸荣;魏彪 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军总后勤部卫生部药品仪器检验所 |
主分类号: | C07K14/765 | 分类号: | C07K14/765;C07K16/18;G01N33/53 |
代理公司: | 北京恒都律师事务所 11395 | 代理人: | 李向东 |
地址: | 100071 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人工 抗原 克隆 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种米诺地尔人工抗原,其特征在于,其结构式为:
2.根据权利要求1所述的一种米诺地尔人工抗原的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)取米诺地尔(Minoxidil),溶于甲醇中,再加水稀释,即得溶液Ⅰ;
(2)取蛋白载体,溶于pH值为7.2-7.4的缓冲溶液中,即得溶液Ⅱ;
(3)取25%的戊二醛(GA),加水稀释40~50倍,即得溶液Ⅲ;
(4)量取溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ,其中溶液Ⅰ和溶液Ⅲ的摩尔浓度比为50~100:1,将溶液Ⅰ和溶液Ⅲ混合均匀,混合后溶液逐滴加入到溶液Ⅱ中,溶液Ⅰ和溶液Ⅲ的混合液与溶液Ⅱ的体积比为1~2:5,搅拌8-12小时;
(5)将步骤(4)所得混合溶液装入透析袋中,对水透析4-5天,每天更换2-3次透析液,收集透析外液,即得米诺地尔人工抗原。
3.根据权利要求2所述的一种米诺地尔人工抗原的制备方法,其特征在于,所述蛋白载体为牛血清白蛋白(BSA)。
4.根据权利要求2所述的一种米诺地尔人工抗原的制备方法,其特征在于,所述溶液Ⅰ和溶液Ⅲ的摩尔浓度比为80:1。
5.根据权利要求1所述的一种米诺地尔人工抗原的多克隆抗体,其特征在于,所述米诺地尔人工抗原的多克隆抗体是能与所述米诺地尔人工抗原发生特异性免疫反应的免疫球蛋白。
6.根据权利要求5所述的一种米诺地尔人工抗原多克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将制备好的米诺地尔人工抗原作为免疫原,对小鼠进行注射;
(2)第一次免疫注射后,每隔2周注射一次,即加强免疫;
(3)从第二次加强免疫起,每次加强免疫后的第7-10天,剪尾釆血,免疫注射4-6次;
(4)从采集的血液中分离获得抗血清。
7.根据权利要求5所述的一种米诺地尔人工抗原多克隆抗体的应用,其特征在于,所述多克隆抗体用于米诺地尔及其盐和衍生物的免疫检测。
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