[发明专利]两头尖提取物的制备方法及其应用

说明书

本发明提供一种两头尖提取物的制备方法：将两头尖烘干脱水后超微粉碎，加入乙酸乙酯提取，过滤，收集滤渣用乙醇提取，过滤取上清，减压浓缩后加入甲醇‑水溶液进行超声溶解，然后在C18反相分离色谱柱分离纯化，采用A超纯水、B甲醇二元流动相，分离条件为0～5min 95％A等度洗脱，5～15min 87％A等度洗脱，15～25min40％A等度洗脱，25～35min 30％A等度洗脱，35～45min 25％A等度洗脱，45～55min100％B等度洗脱，收集47‑48min洗脱液，减压浓缩并烘干，得到本发明目的组分两头尖提取物。该分离方法稳定，重复性高，制备量大，操作简单省时，适合工业化大生产。

技术领域

本发明涉及中药提取技术领域，具体涉及一种两头尖提取物的制备方法，以及该得到的两头尖提取物在制备抗肺癌药物或抗肺癌保健品中的应用。

背景技术

两头尖又名竹节香附，为毛莨科银莲花属多被银莲花(AnemoneraddeanaRege1)的干燥根茎。主要分布于东北三省及山东、河北、山西等地，以吉林省产量最多。药材多夏季采挖，除去残茎及须根，晒干。此药首载于明朝刘文泰所著《本草品汇精要》。具有“祛风除湿，消痈肿”之功效。早在清代，王旭高的“定癌散”曾以两头尖治疗乳癌。现在临床用于风寒湿痹，手足拘挛，骨节疼痛，痈疽肿痛。多与其它药物配伍，不单方入药，是著名中成药“活络丹”和“再造丸”的主要原料。据文献报道，两头尖中含有大量的皂苷类成分，还含有内酯类、挥发油类、油脂类、生物碱、氨基酸、微量元素及糖类等成分。研究表明两头尖还具有抗肿瘤、抗炎、镇痛、镇静和抗惊厥作用。

授权公告号为CN1210289C的发明专利公开了一种两头尖提取物的制备工艺，该工艺主要采用乙醇提取+硅胶干柱层析的方法进行分离，得到无色粉末状结晶两头尖皂甙D。授权公告号为CN1312170C的发明专利公开了一种两头尖提取物的制备工艺，它主要是通过采用碱提取+乙醇提取的方法来提高目的提取物中银莲花素A的收率和纯度。授权公告号为CN102584927B的发明专利公开了一种从两头尖中分离提取一类三萜类化合物的方法，该方法先乙醇提取，接着依次用石油醚萃取、乙酸乙酯萃取、正丁醇萃取，再经柱层析，高效液相制备，得到目的产物。该提取方法步骤繁琐，耗时，重复性差，稳定性差，不适用工业化大生产。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对以上现有技术的不足，提供一种两头尖提取物的制备方法，该方法对样品初步处理后，主要采用高效液相色谱进行分离纯化，分离方法稳定，重复性高，制备量大，操作简单省时，适合工业化大生产。

本发明所采用的技术方案为：

一种两头尖提取物的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)以两头尖为原料，室温阴干处理后，在40～60℃温度下烘干脱水，然后进行超微粉碎处理，获得超微粉；

(2)将步骤(1)所得的超微粉按1g︰(4～12)mL的料液比加入乙酸乙酯，提取1～6h，每0.5～1h搅拌一次，室温静止1～5h后取上清液过滤除去杂质，收集滤渣重复1～3次；将被乙酸乙酯提取过的滤渣置阴凉处晾干，称重后，换成乙醇继续按上述方法提取；合并乙醇提取的上清液，减压浓缩至膏状，获得两头尖小分子提取物；

(3)按质量体积比(g/mL)加入5～10倍的甲醇-水溶液，进行超声溶解，溶解后过有机滤膜，得到两头尖小分子提取物的样品溶液；