[发明专利]一种早期检测肝癌发生或转移的hsa-mir-135a、hsa-mir-302d和hsa-mir-10b联合检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及医学生物检测技术领域，是一种用于检测血浆或血清中的hsa-mir-135a、hsa-mir-302d及hsa-mir-10b的含量，来预测肝癌发生及转移的试剂盒、及其检测方法。

背景技术

肝癌严重威胁是我国人民生活健康的疾病之一，其致死率位居第三位。全世界每年因肝癌死亡的患者中，约有40％来自中国。随着治疗方法和影像检测技术水平的提高，早期肝癌根治切除术后的五年生存率已大大提高。然而，由于大部分的肝癌患者在确诊的时候已经处于晚期，肝癌患者的整体治疗效果及病人预后都比较差。

另外，在肝癌的治疗过程中，癌症的复发和转移是比较常见问题。大约90％的肝癌死亡患者跟癌症的转移和复发有关。目前临床应用多种治疗手段(手术切除、放疗，化疗及联合治疗方法)，仍无法彻底解决肿瘤治疗中存在的复发和转移的问题。秉承早发现早治疗的原则，及早发现肝癌的发生和转移，对于改善患者预后，提高临床治疗效果至关重要。

目前对于肝癌的诊断主要依靠影像学检查、病理活检结合甲胎蛋白(AFP)等分子指标检测能够反应早期肝癌发生和转移的检测指标还未有临床应用。

microRNA(miRNA)是一类长度约21～25碱基的非编码小分子RNA，广泛存在于多细胞生物和病毒体内。目前越来越多的研究显示，miRNA广泛参与了生物体多种生理过程，其表达改变及功能失调能够导致肿瘤发生、白血病以及病毒感染等多种病理现象。由于在血浆和血清中稳定性好且表达具有组织特异性(Calin G A,Croce M C.MicroRNA signatures in human cancers.Nat Rev Cancer,2006,6(11):857—866)，miRNA在疾病的血清学检测应用方便的到广泛的关注。

目前，诸多报道患者血清中miRNA能够患者疾病诊断及预后分析的标志分子。Zhang ZQ等人报道肝癌患者外周血清中miR-143和miR-215能够作为肝炎及肝癌的诊断标志物(Zhang ZQ,Meng H,Wang N,Liang LN,Liu LN,et al.Serum microRNA 143and microRNA 215as potential biomarkers for the diagnosis of chronic hepatitis and hepatocellular carcinoma.Diagn Pathol.2014.9:135)。Shen J等人报道患者血清中miR-148b和miR-133能够作为乳腺癌的诊断标志物(Shen J,Hu Q,Schrauder M,Yan L,Wang D,et al.Circulating miR-148b and miR-133a as biomarkers for breast cancer detection.Oncotarget 2014.5:5284-5294)。另外，在前列腺癌、肺癌及结肠癌等癌症中都有不同的血清miRNA可以作为检测标记物(Cheng G.Circulating miRNAs:Roles in cancer diagnosis,prognosis and therapy.Adv Drug Deliv Rev 2014Sep16.pii:S0169-409X(14)00199-9)。说明血清miRNA作为肿瘤检测标志物的广泛性。