[发明专利]一种杏鲍菇原生质体制备方法无效
| 申请号: | 201410706591.4 | 申请日: | 2014-11-27 |
| 公开(公告)号: | CN104388321A | 公开(公告)日: | 2015-03-04 |
| 发明(设计)人: | 肖建中;张东旭 | 申请(专利权)人: | 丽水学院 |
| 主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人: | 张勇 |
| 地址: | 323000*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 杏鲍菇 原生 质体 制备 方法 | ||
1.一种杏鲍菇原生质体制备方法,其特征在于,步骤如下:
1)将蜗牛酶和纤维素酶溶解于稳渗剂,微孔滤膜过滤除菌后作为酶液备用;
2)用稳渗剂清洗杏鲍菇液体培养基中的菌丝,离心后收集湿菌体;
3)将湿菌体加入步骤1)制备的酶液,35℃-40℃水浴酶解3-5小时。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤1)的酶液中加入0.1%-0.5%的γ谷氨酰半胱氨酸。
3.根据权利要求2所述方法,其特征在于,所述蜗牛酶含量为1%-3%,所述纤维素酶含量为1%。
4.根据权利要求3所述方法,其特征在于,所述蜗牛酶含量为3%。
5.根据权利要求2所述方法,其特征在于,步骤1)的酶液pH为5.5。
6.根据权利要求2所述方法,其特征在于,水浴温度为37℃。
7.根据权利要求2所述方法,其特征在于,酶解时间为3小时。
8.根据权利要求2所述方法,其特征在于,所述稳渗剂为甘露醇、蔗糖、氯化钾、硫酸镁或葡萄糖。
9.根据权利要求2所述方法,其特征在于,所述稳渗剂为甘露醇,含量为6mol·L-1。
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