[发明专利]一种从食用菌多糖提取醇沉上清液中回收蛋白的方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种从食用菌多糖提取醇沉上清液中回收蛋白的方法。

(二)背景技术

食用菌是人类可食用的大型真菌，常见的有香菇、灰树花等。我国食用菌资源丰富，已知接近2000种，据统计，目前我国食用菌产量在2000万吨左右，产量占全球的75％以上，居世界产量榜首。食用菌类食品集营养性、功能性、美味性、安全性于一身，被营养学家推荐为十大健康食品之一。食用菌含有丰富的营养成分，其中主要包括多糖类、蛋白类、多肽类、三萜类、腺嘌呤核苷等，还含有丰富的维生素和矿物质。

其中食用菌多糖是从食用菌子实体、菌丝体和发酵液中分离出的一类活性多糖。具有，具有增强免疫力、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、降血脂、降血糖、抗辐射、抗溃疡等多种生物活性，在国际上被称为生物反应调节剂。如香菇多糖是典型的T细胞激活剂，能促进白细胞介素的产生等，被认为是一种特殊免疫增强剂；其免疫作用是促进淋巴细胞活化因子(LAE)的产生，释放各种辅助性T细胞因子，增强宿主腹腔巨噬细胞吞噬率，恢复或刺激辅助性T细胞，促进抗体生成，抑制巨噬细胞释放。

除多糖外，大部分食用菌的蛋白质含量与牛肉相当，是一般蔬菜的2倍多，如香菇和灰树花子实体中均含有20％～30％的蛋白质。

目前，对食用菌有效成分的利用主要仍集中在多糖的提取，现有的食用菌多糖生产企业仅仅提取提取食用菌原料中的活性多糖。然而多糖的传统水提醇沉过程中通常会产生大量副产物，如水提后的滤渣以及醇沉后的上清液均含有一定量的蛋白质，尤其是醇沉上清液，经测定其中蛋白含量占水提溶液蛋白总量的25～40％。但是现有的部分多糖生产企业仅是通过精馏塔回收乙醇，塔底浓缩的部分因含有小分子糖类成分，粘度高，加热蒸馏时容易结焦，不仅有碍乙醇回收，而且设备的清洗困难。另外还有不少企业将醇沉上清液当作废液直接处理掉，不仅浪费了优质的蛋白资源，也增加了企业的“三废”处理成本。随着政府和民众对环境污染的日益重视，各类多糖生产企业十分必要对废液进行污水处理。

近年来，食用菌多糖生产企业因产品和工艺雷同，市场竞争日趋激烈，利润逐年下滑，急需对生产副产物中的蛋白等资源进行回收和综合利用，开发新产品，以利于增加企业的经营效益。

现有专利有少量从食用菌中直接提取蛋白，如天津大学的陈海霞等人的发明专利CN 102382181 B，涉及了一种从香菇中提取具有抗氧化降血糖作用的活性蛋白的方法。未见有文献或专利从食用菌多糖提取时的醇沉上清液中回收或分离蛋白。

(三)发明内容

本发明提供一种从食用菌多糖提取的醇沉上清液中回收蛋白的方法，以解决目前食用菌多糖醇沉上清液普遍作为废液，对其中的蛋白回收利用不足，且污水处理成本高等问题。

针对目前食用菌多糖提取时的醇沉上清液普遍作为废液，对其中的蛋白回收利用不足，且污水处理成本高等问题，本发明专利采用超滤浓缩除杂、等电点沉淀和喷雾干燥等方法从食用菌多糖提取废液中高效回收高品质蛋白成分。

本发明采用的技术方案是：

一种从食用菌多糖提取醇沉上清液中回收蛋白的方法，所述方法为：

取食用菌子实体经多糖提取、醇沉后的上清液，采用3～8KD截留分子量的超滤膜进行加压超滤，加压压力为3～5bar，超滤得到浓缩液，调pH值为4.0～5.0，搅拌进行等电点沉淀，然后离心，所得蛋白沉淀加蒸馏水搅拌分散后喷雾干燥制得食用菌回收蛋白。

所述食用菌子实体的多糖提取、醇沉操作为本领域技术人员公知的常规手段，采用常规热水提取、乙醇醇沉操作得到的上清液均可适用于本发明。

具体的，本发明优选多糖提取、醇沉操作按以下步骤进行：取食用菌子实体加30～40倍重量的水，加热回流提取2～4h，离心去渣，得上清提取液加热浓缩至原有体积的20～30％(优选25％)，所得提取浓缩液加入4倍体积的体积分数95％乙醇醇沉，过滤或离心分离，取上清液即为食用菌子实体经多糖提取、醇沉后的上清液。

本发明上述操作步骤只是给出实施例的具体例子，并不限于上述操作条件，采用其他类似工艺进行多糖提取、醇沉得到的上清液均可用本发明方法进行回收蛋白。

本发明的食用菌子实体一般选择子实体干重时的蛋白含量大于18％的食用菌子实体原料。一般优选香菇、灰树花、姬松茸、双孢蘑菇、茶树菇、秀珍菇等。

所述超滤采用3～8KD截留分子量的超滤膜进行加压超滤，除去小分子的单糖、寡糖、肽和无机盐等杂质，浓缩蛋白。

所述调pH值一般采用0.1mol/L的盐酸调pH值。