[发明专利]一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法有效
| 申请号： | 201410672070.1 | 申请日： | 2014-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN104388538A | 公开（公告）日： | 2015-03-04 |
| 发明（设计）人： | 章波;庞学利;黄钢;何刚;徐小峰;宋敏 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学 |
| 主分类号： | C12Q1/66 | 分类号： | C12Q1/66;C12Q1/34;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 组蛋白 乙酰化 抑制剂 筛选 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)将质粒转染宿主细胞形成稳定细胞株；
2)将获得的细胞株种植于96孔培养板，过夜贴壁后更换培养基，并加入待测样品；
3)取出上述培养板，加入细胞裂解液，取上清液，测定药物处理前后细胞的荧光素酶基因表达强度，荧光素酶基因增强，即说明待测样品为筛选的得到的组蛋白去乙酰化酶抑制剂。
2.根据权利要求1所述的一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法，其特征在于：所述的质粒为7TFP质粒，包含6个串联重复TCF4转录因子。
3.根据权利要求1所述的一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法，其特征在于：步骤(1)所述的质粒转染采用慢病毒转移的方式。
4.根据权利要求1所述的一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法，其特征在于：所述的宿主细胞为结肠癌细胞HCT116、细胞EK293或SW480。
5.根据权利要求4所述的一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法，其特征在于：所述的结肠癌细胞株HCT116用于稳定表达荧光素酶基因的用途。
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