[发明专利]一种稳定同位素标记β受体激动剂类化合物的合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种同位素标记化合物的制备方法，尤其是涉及一种稳定同位素标记β受体激动剂类化合物的合成方法。

背景技术

随着社会的发展和进步，人类的生活水平不断提高，对肉、蛋、奶等动物源性食品的需求量逐年增加。然而，目前食品安全却不容乐观，特别是动物源性食品安全问题，已成为全球性的议题，而兽药残留是导致动物源性食品安全性下降的主要原因。随着兽药和药物添加剂在畜禽饲养过程中的长期的不合理使用，残留在动物体内的兽药及其添加剂随着食物链进入人体，对人类的健康构成潜在威胁。因此，加强对兽药残留的检测，对保护生态环境和人类的身体健康有着极其重要的现实意义。

β-受体激动剂是一类化学结构和生理功能类似肾上腺素的苯乙胺类药物，它们在临床上可用于治疗人和动物的哮喘类似病症。β-受体激动剂类药物在动物饲养过程中具有促进动物生长和动物营养再分配的功效，其易在动物体内及可食性组织中残留。人食用含“β-受体激动剂”较高的食物后，在15min～6h内即可发生急性中毒，持续时间从90min～2d不等。中毒症状：心悸、头疼、目眩、恶心、呕吐、发烧、颤栗、神经过敏、血管扩张、心率加快、肌肉振颤等，严重时甚至可能造成生命危险。近年来，畜牧生产上又出现了妥布特罗、溴布特罗等类似“瘦肉精”类β-受体激动剂，严重危害了畜产品质量安全，这些药物残留问题引发的国际贸易摩擦和食品安全事件不断发生，严重影响我国养殖业的发展和走向国际市场。

目前，欧盟(EC)1996禁止使用用于动物促生长作用的β-受体激动剂，同时为了保护消费者的利益，欧盟官方也设立了最大残留限量(MRLs)牛或马肉中MRL为0.1μg/kg，牛或马的内脏(肝、肾)中MRL为0.5μg/kg；牛奶 中克伦特罗的MRL为0.05μg/kg。

目前使用的受体激动剂已有30多种。农业部235号公告《动物性食品中兽药最高残留限量》规定在所有食用动物的可食组织中不得检出此类药物。由于试样前处理均需多次萃取，多次离心，操作烦琐，前处理时间长，有机溶剂用量大，实际检测工作中，基质效应、前处理等因素对分析方法测定结果影响较大。发达国家一般要求采用同位素质谱稀释法测试，能够有效地校正方法中出现的误差，显著提高目标化合物的回收率和方法稳定性。

稳定同位素稀释质谱法IDMS(Isotope Dilution Mass Spectrometry)是采用与被测物质具有相同分子结构的稳定同位素标记的化合物作为内标物质，用高分辨液相色谱-质谱联用仪(LC/MS)进行检测，通过质谱仪测量相应质量数的离子的比值并与标准的比值比较达到准确定量的目的。采用同位素内标可以有效消除样品在化学和物理的前处理步骤中所引起的回收率差异，从而避免因为样品处理过程的损失对检测结果造成的偏差。

稳定同位素稀释质谱法的这种特性与LC/MS的高灵敏度和处理复杂样品的能力结合起来，使得色谱/同位素稀释质谱技术被公认为是一种测量微量及痕量有机物的基准方法。而稳定同位素标记β受体激动剂类化合物内标的开发成功，将为更为更准确定量β受体激动剂类化合物提供标准试剂，完善我国食品安全检测技术体系，满足我国食品安全发展的需求。

目前关于稳定同位素标记β受体激动剂类化合物合成路线公开文献较少，中国专利CN102796013.A公开了一种氘标记沙丁胺醇及其衍生物的合成方法，但其实验过程中，无关键中间体的稳定同位素标记叔丁胺的合成方法，反应过程中，涉及高温高压还原，操作复杂，还原过程，需要钯碳作为催化剂，价格昂贵，且其同位素丰度控制较难。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种工艺路线简单，产品稳定，易于制备的稳定同位素标记β受体激动剂类化合物的合成方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种稳定同位素标记β受体激动剂类化合物的合成方法，其特征在于，该方法采用以下步骤：

(1)以稳定同位素标记的甲醇为原料，与丙酮或稳定同位素标记丙酮反应并氨化后得到稳定同位素标记叔丁胺；

(2)采用溴代酮类化合物作为β受体激动剂类化合物前驱体与稳定同位素标记叔丁胺反应制备得到稳定同位素标记β受体激动剂类化合物。

步骤(1)具体采用以下方法：

a、在低温下向稳定同位素标记的甲醇滴加丙酮或稳定同位素标记丙酮，控制稳定同位素标记的甲醇与丙酮或稳定同位素标记丙酮的摩尔比为1∶0.5～1∶3，滴加完毕后常温反应0.5～24h，利用稀盐酸淬灭反应，得到稳定同位素标记叔丁醇；