[发明专利]一种从女贞子中提取熊果酸和齐墩果酸混合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及从果实中提取具有药用价值生物质的技术，具体地说是一种从女贞子中提取熊果酸和齐墩果酸混合物的方法。

发明背景：

女贞子系木樨科常绿乔木女贞（Ligustri Lucidum ）的干燥成熟果实，呈卵形，表面灰褐色或紫黑色，外果皮薄，内果皮木质，黄棕色，具纵棱，10-11月份成熟。其性凉，味甘，微苦，归肝，肾经，具有滋补肝肾，明目乌发的功能，中医临床主要用于眩晕耳鸣，腰膝瘦软，须发早白，目暗不明等症。女贞子果实中富含熊果酸和齐墩果酸。

所述熊果酸（Ursolic acid）又叫乌索酸，齐墩果酸（Oleanolic acid）又名土当归酸，都是女贞子的主要药效成分，同为五环三萜类化合物，分子式如下，均为C₃₀H₄₈O₃。

熊果酸在无水乙醇中为有光泽的棱柱体，在稀乙醇中呈细毛样针状结晶物，低含量时呈现为棕黄色或黄绿色的粉末状。有特殊的气味，熔点为283～285 ℃。易溶于二氧六环、吡啶，可溶于甲醇、乙醇、丁醇、丁酮，略溶于丙酮，微溶于苯、氯仿、乙醚，不溶于水和石油醚。有研究证实，熊果酸有多方面的药理作用，它对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌均有活性，具有抗溃疡、镇咳、抗癌、抗突变、抗氧化和诱导癌细胞分化的作用；其毒性小、抗肿瘤活性强，是一种很有开发价值的植物活性成分,有望可成为低毒有效的新型抗癌药物。

齐墩果酸为白色针状结晶体，无味，不溶于水，可溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚、丙酮等有机溶剂，以游离体和糖配体的形式存在于多种植物中。也有研究证实，齐墩果酸除具有消炎、镇静、强心、利尿、降血脂、降血糖以及护肝降酶、增强免疫等作用外，还对染色体损伤具有保护作用，对动脉粥样硬化有预防作用。临床用于治疗传染性急性黄疸型肝炎，慢性病毒性肝炎，具有明显的降低谷丙转氨酶及退黄效果。

我国女贞子植物分布广泛、资源丰富。目前从女贞子中分别单独提取熊果酸、齐墩果酸的工艺已有研究。如，陕西科技大学学报（2008，26（4）:85-88）刊登了郑艳,苏丹等人“女贞子中熊果酸的提取工艺研究”一文。该文所作的工艺研究是以女贞子全果为原料，通过试验证实女贞子中提取熊果酸的主次影响因素为：提取温度>提取时间>料液比>乙醇体积分数，所确定的最佳工艺条件：提取温度为80℃，提取时间为120min，料液比为1∶9，乙醇体积分数为90%，提取次数为2次。但由于该项研究在提取前未对女贞子原料作相关处理，故存在使用提取溶剂需求量多、能源消耗大等缺陷。

又如遵义医学院学报【2003，26（5）:474-475.】刊登了马忠先, 蒲家志,孙志勇等 “女贞子中提取齐墩果酸的实验方法” 一文。该文所述方法是将女贞子分离成了果皮、果肉与种皮、种仁，且用果皮、果肉作为原料，在93%～94%的工业乙醇中回流提取后, 采用“碱溶盐析”法分离，得到了齐墩果酸；又如张来新赵卫星,杨 琼等人【从中药材女贞子中提取药效成分齐墩果酸最佳工艺研究[J].化学工程师, 2011, 10: 11-13】，披露了利用超声波破碎法使皮仁分离并提取、经酸沉碱溶盐析、酸处理脱色脱脂、纯化结晶等步骤研究提取的工艺条件。而我们通过液相色谱分析和文献查阅得知，熊果酸与齐墩果酸互为三萜酸类同分异构体，性质相似，依马忠先和张来新等人提供的提取与分离方法是很难将二者分离的。这样，一方面使得女贞子目标提取或评价的指标不很确切，另一方面齐墩果酸和熊果酸又有可能提取不充分, 造成资源浪费。且该研究的提取工艺中，将女贞子分离出果皮、果肉后，直接在高压锅中于1.5kg蒸汽压力下蒸煮，或由超声器作超声处理，后续再直接采用乙醇回流法或超声提取。可见，该方法存在仅仅提取了游离态的熊果酸与齐墩果酸，没有将女贞子果实中以糖配体形式存在的熊果酸和齐墩果酸脱出，故存在后续乙醇提取时，以糖苷结合的熊果酸与齐墩果酸难以从植物细胞中被提出的不足之处。

发明内容

本发明所提供的一种从女贞子中同时提取熊果酸、齐墩果酸的方法，是鉴于熊果酸、齐墩果酸同为五环三萜类化合物，化学物理性质相似，二者又很难分离的特性，先将女贞子处理成为熊果酸和齐墩果酸含量高的物料，再通过自行研究的提取与分离工艺技术，获得熊果酸和齐墩果酸的粗混合物，达到提取物料总提取率高，消耗提取溶剂少的发明目的。

本发明方法的技术解决方案