[发明专利]一种猪圆环病毒2型灭活冻干疫苗的制备方法有效
| 申请号： | 201410659949.2 | 申请日： | 2014-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN104383527A | 公开（公告）日： | 2015-03-04 |
| 发明（设计）人： | 唐荣宏;吕茂杰;李亚杰;杨保收;梁武 | 申请（专利权）人： | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/12 | 分类号： | A61K39/12;A61K9/19;A61K47/42;A61P31/20 |
| 代理公司： | 天津滨海科纬知识产权代理有限公司 12211 | 代理人： | 杨慧玲 |
| 地址： | 300308 天津市滨海新区空港*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种猪 圆环 病毒 型灭活冻干 疫苗 制备 方法 | ||
1.一种猪圆环病毒2型灭活冻干疫苗的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1)取猪圆环病毒2型病毒培养液进行澄清处理，得到病毒液；
2)对步骤1)得到的病毒液进行超滤浓缩；
3)使用分子筛层析柱对步骤2)浓缩后的病毒液进行纯化；
4)利用β-丙内酯对步骤3)纯化后的毒液进行灭活；
5)对步骤4)灭活后的病毒液实施冻干、制剂。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤1)所述澄清处理包括以下步骤：对病毒培养液先用6～10层纱布过滤，再用0.5～2μm的双层滤膜进行过滤。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤2)所述浓缩的倍数为20～50倍。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤2)所述超滤是切向流超滤。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于步骤2)所用滤膜的孔径为30～50K。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤3)所述分子筛层析柱所用的层析树脂选自Sepharose 4 Fast Flow、Sepharose 6 Fast Flow、Sepharose CL-2B或Sepharose CL-4B的其中一种。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于步骤3)利用柱层析纯化时，按柱体积的5～8％(v/v)上样。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤3)纯化后的病毒液中病毒效价≥108.5TCID50/ml，总蛋白浓度≤300ug/mL。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤4)所述灭活包括以下步骤：取β-丙内酯稀释700～900倍，将稀释后的β-丙内酯溶液以1:(3～8)(v/v)的比例加入到步骤3)纯化后的病毒液中，灭活1～3h。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤5)实施冻干时，所用冻干保护剂是由以下重量百分数的成分组成的：
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