[发明专利]一步法反转录PCR检测和分型埃博拉病毒5种亚型的引物、探针及试剂盒

权利要求书

1.一种一步法反转录PCR检测和分型埃博拉病毒5种亚型的引物、探针，其特征在于：其核苷酸序列如下：

上游引物：5’-CGGACACACAAAAAGAAAGAAG-3’

6-FAM探针:5’-6FAM-TAGTTAYTCGCACACAAWARRK-磷酸-3’

LCRed640探针:5’-GAGGAAAATTDTTAATCTTCCTC-LCRed640-3’

Z-下游引物(EBOV扎伊尔型)：5’-GAACTTGTGATGTGATAAGACCTA-3’

S-下游引物(EBOV苏丹型)：5’-AAAGGCAAAGCAATACGACC-3’

R-下游引物(EBOV莱斯顿型)：5’-CATGTTGATGGTAATTGGTAATAG-3’

T-下游引物(EBOV塔伊森林型)：5’-GGAATGGGGTACTTCTGAACA-3’

B-下游引物(EBOV本迪布焦型)：5’-GCCAATTCTCAGTGTTGGTATT-3’。

2.一种一步法反转录PCR检测和分型埃博拉病毒5种亚型的试剂盒，其特征在于：包括样品DNA模板或者定量标准试剂、PCR缓冲液、FRET-上游引物、FRET-下游引物、的6-FAM探针、LCRed640探针、商业化Taq酶、dNTP、商业化反转录酶、商业化RNA酶抑制剂。

3.一种一步法反转录PCR检测和分型埃博拉病毒5种亚型的方法，其特征在于：用权利要求1所述的引物和探针，特异地扩增埃博拉5种亚型的核酸，埃博拉5种亚型分别为扎伊尔型、苏丹型、莱斯顿型、塔伊森林型和本迪布焦型，并可依据其高分辨率熔解曲线或琼脂糖凝胶电泳中目的条带大小的不同区分5种亚型的埃博拉病毒。