[发明专利]三叶青地上部分总黄酮的提纯方法

说明书

一种三叶青地上部分总黄酮的提纯方法，包括预处理步骤、提取步骤和纯化步骤：取三叶青地上部分粉碎成粗粉，加入50～70％乙醇加热回流提取，提取液回收干燥得粗提物；将粗提物用蒸馏水配制成混悬液，调节混悬液的pH值后离心，取上清液，上样于大孔吸附树脂柱上；吸附完毕后静置，先用蒸馏水洗至无混浊后，再用40％～50％乙醇洗脱，收集0.5～2.0BV区间的洗脱液，浓缩，干燥，即得三叶青地上部分总黄酮。本发明操作简单、成本低、易于工业化生产、醇提与纯化效率及制备获得的三叶青地上部分总黄酮有效部位成分含量高，环境污染小。

技术领域

本发明具体涉及一种中草药三叶青地上部分总黄酮的提纯方法。

背景技术

三叶青是我国特有的珍稀药用植物，属于葡萄科崖爬藤属植物。三叶青即三叶崖爬藤(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg.)，别名蛇附子、石抱子、三叶扁藤、金线吊葫芦、金丝吊葫芦、破石珠、三叶对等。三叶青以块根或全草入药，分布在浙江、江西、福建、台湾、湖北、广东、广西、四川、贵州、云南等地。据医书记载，三叶青有清热解毒、祛风化痰、活血止痛的功效，常用于治疗高热惊厥、肺炎、哮喘、肝炎、风湿、月经不调、咽痛、瘰疬、痈疔疮疖等。

近年来，三叶青块根因其在抗肿瘤、保肝和免疫调节上的突出作用，大量被药用，与此同时，民间将三叶青地上部分的煎煮液用于辅助抗肿瘤抗炎效果良好，为充分利用三叶青资源，为深入开发利用三叶青地上部分的药用价值，我们对其进行了研究，研究结果表明：三叶青地上部分含有黄酮类成分等，药理实验证明，本发明的三叶青地上部分总黄酮提取物具有良好的抗炎解热镇痛作用。

因此，研究三叶青地上部分总黄酮提取物制备工艺，对进一步开发安全、有效的三叶青抗炎解热镇痛制剂、充分利用珍稀药用植物三叶青地上部分中药资源具有重要的现实意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题，在于提供一种中草药三叶青地上部分总黄酮的提纯方法，其操作简单、成本低、易于工业化生产、醇提与纯化效率及制备获得的三叶青地上部分总黄酮有效部位成分含量高，环境污染小。

本发明是这样实现的：一种三叶青地上部分总黄酮的提纯方法，包括以下步骤：

(1)预处理：将干燥后的三叶青地上部分粉碎后，得三叶青地上部分粗粉；

(2)提取：采用乙醇回流提取法对三叶青地上部分粗粉进行提取，获得粗提物；

(3)纯化：将所述粗提物用蒸馏水配制成总黄酮含量为2.0～4.0mg/mL的混悬液，并调节混悬液的pH值为3.0～4.0；将混悬液离心，取上清液，以1.0～3.0BV/h的上样流速上样于大孔吸附树脂柱上；吸附完毕后静置，然后按1.0～3.0BV/h的洗脱速度进行洗脱，先用蒸馏水洗至无混浊后，再用3～5BV浓度为40％～50％乙醇洗脱，收集0.5～2.0BV区间的洗脱液，将所述洗脱液回收乙醇，得浸膏，将浸膏于40～60℃减压干燥至干，即得棕黄色粉末状的三叶青地上部分总黄酮。

进一步地，所述步骤(2)的具体操作方法如下：

以三叶青地上部分粗粉质量15～30倍的50％～70％乙醇为提取剂，回流提取3次，每次回流时间为2h，合并提取液并回收乙醇，将提取液于40～60℃下减压干燥，获得粗提物。

进一步地，所述步骤(3)的大孔吸附树脂柱为HPD-100大孔吸附树脂柱，HPD-100大孔吸附树脂柱的径高比为1:4～1:10，且上柱量中，所述三叶青地上部分粗粉与树脂量的比例为2:1～1:1。