[发明专利]神经氨酸酶抑制剂筛选方法和应用

权利要求书

1.一种神经氨酸酶抑制剂的筛选方法，其特征是采用电泳介导的微分析技术，在毛细管中用酶催化水解底物的一步反应，然后在紫外214 nm处直接测定产物峰面积实现酶活的测定和酶抑制剂的筛选方法；

所述的酶为神经氨酸酶；

所述的底物为2-(4-甲基伞形酮-a-N-乙酰神经氨酸)。

2.根据权利要求1所述的一种神经氨酸酶抑制剂的筛选方法，其特征在于： 

1）将反应缓冲液、酶溶液和底物溶液分别以1-100纳升体积依次导入经过分离缓冲液处理过的毛细管，所述的酶的浓度范围为0-1 mg/mL，底物的浓度范围为0-200 mM，所述的底物溶液含或不含待筛选化合物；

2）使酶和底物反应0-20分钟；

3）加上1千伏至30千伏电压进行电泳分离；酶活用214nm处产物峰面积表示；

所述的缓冲液是pH为2-12缓冲液。

3.根据权利要求2所述的一种神经氨酸酶抑制剂的筛选方法，其特征在于：所述的反应缓冲液是pH为6-10缓冲液，所述的分离缓冲液是pH为2-6缓冲液。

4.根据权利要求2所述的一种神经氨酸酶抑制剂的筛选方法，其特征在于：所述的缓冲液是采用硼酸盐、磷酸盐和磷酸、氢氧化钠的缓冲液。

5.根据权利要求2所述的一种神经氨酸酶抑制剂的筛选方法，其特征在于：所述的酶的浓度范围为0.1-1 mg/mL。

6.根据权利要求1或2所述的一种神经氨酸酶抑制剂的筛选方法的应用，其特征在于：用于神经氨酸酶抑制剂的筛选。

7.根据权利要求6所述的一种神经氨酸酶抑制剂的筛选方法的应用，其特征在于：用于中药粗提液和海参寡糖中神经氨酸酶抑制剂的筛选。

8.根据权利要求6所述的一种神经氨酸酶抑制剂的筛选方法的应用，其特征在于：为快速筛选发现抗流感病毒药物奠定理论基础。