[发明专利]一种复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法

权利要求书

1.一种复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法，其特征在于所述方法步骤如下：

一、按照料液比为1:30~70g/mL的比例向金针菇子实体干粉中加入缓冲液，再加入一定量的复合酶进行的酶解反应，其中复合酶的添加量为金针菇子实体干粉质量的0.5~1.5%，反应时间为50~90 min，酶解温度为30~70℃，酶解pH值为3~7；

二、酶解后，进行高压热水浸提，控制浸提温度为75~121℃，浸提时间为40~120 min；

三、提取后进行离心，取上清液，浓缩，采用Sevage法除蛋白，离心，将上清液醇沉过夜，离心，所得沉淀用无水乙醇洗涤2~3次，将沉淀干燥得到金针菇多糖。

2.根据权利要求1所述复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法，其特征在于所述缓冲液为磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液。

3.根据权利要求1所述复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法，其特征在于所述料液比为1:60g/mL。

4.根据权利要求1所述复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法，其特征在于所述复合酶由纤维素酶和木瓜蛋白酶按1:1的质量比混合而成。

5.根据权利要求1或4所述复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法，其特征在于所述复合酶的添加量为金针菇子实体干粉质量的1.25%。

6.根据权利要求1所述复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法，其特征在于所述酶解反应时间为80 min、酶解温度为50℃、酶解pH值为6。

7.根据权利要求1所述复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法，其特征在于所述高压热水浸提温度为108℃，浸提时间为80 min。

8.根据权利要求1所述复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法，其特征在于所述高压浸提后对离心的上清液所采取的浓缩方法是减压浓缩或在70℃水浴下蒸发浓缩到原体积的1/2。

9.根据权利要求1所述复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法，其特征在于所述Sevage法除蛋白是采用氯仿-正丁醇混合溶液按与样物提取液4:1体积比添加，充分振摇30 min后静置12 h。

10.根据权利要求1所述复合酶协同高压热水浸提法提取金针菇多糖的方法，其特征在于所述醇沉是将除蛋白后经离心得到的上清液与95%乙醇按1:3体积比混合，置4℃下沉淀12 h。