[发明专利]一种鉴别白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品的分子标记及其应用

说明书

技术领域

本发明属于水产动物分子遗传学领域，具体地说，本发明涉及应用微卫星标记对白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品进行鉴别。

背景技术

美洲红点鲑(Salvelinus fominalis)和白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)都隶属于鲑形目(Salmoniformes)，鲑科(Salmonidae)，红点鲑属(Salvelinus)。美洲红点鲑，俗称七彩鲑鱼。主要分布于北半球的60°N-41°N范围内，原产于加拿大东部五大湖区、明尼苏达州的密西西比河湾、佐治亚州的北部等地。美洲红点鲑生长快、肉质鲜美、营养丰富，自2000年左右引入我国后迅速成为一种重要淡水养殖鲑科鱼类。白斑红点鲑，俗称白点鲑，原产于日本，1996年由中国水产科学研究院黑龙江水产研究所引入中国，白斑红点鲑定居性强，繁殖期死亡率低，目前已经发展成一个冷水性鱼类的主要养殖品种。在我国的人工养殖条件下，二者的要求较为接近，繁殖水温为10℃左右，繁殖高峰期均在10月下旬到11月中旬，苗种孵出至开口摄食期间最佳的培育水温为8-10℃，饲养期间水温变化在4.7-16.8℃。

两种鱼体型特征和生长速度都较为相似，由于美洲红点鲑体色艳丽，体表斑点有多种颜色，而白斑红点鲑体表斑点主要呈乳白色，仅凭这项特点即可从外观上对上述两种鱼进行区分。中国消费者对美洲红点鲑七彩外观有明显的偏好，形成了对美洲红点鲑的选择性消费偏好；另外从生产者角度考虑，美洲红点鲑繁殖期死亡率显著高于白斑红点鲑，导致养殖成本高于白斑红点鲑。上述两个因素直接引起美洲红点鲑的市场价格要高于白斑红点鲑。但是，鲑鱼主要以刺身(生鱼片)和熏肉的形式销售，而这两种方法一般都需要将鱼皮剥去，而这两种鱼的肉色、口感非常类似，因此，鱼肉制成刺身及熏肉制品后通过感官检查很难区分其真假。于是，一些不法商贩以白斑红点鲑冒充美洲红点鲑，获取超额利润，损害了消费者利益。

因此，现在急需一种准确有效地鉴别两种鱼的方法。

发明内容

本发明提供一种鉴别白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品的分子标记及应用，解决目前没有一种准确有效鉴别上述两种鱼的方法的问题。

本发明的一种鉴别白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品的分子标记，用于PCR扩增分子标记的引物对为AF346686F和AF346686R，具体序列为：

AF346686F:5’-AGTCGTCGGCTTGTCTTC-3’

AF346686R:5’-ACTACGGCTTTCTGGGAT-3’。

本发明的一种鉴别白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品的分子标记的应用，它用于鉴别白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)和美洲红点鲑(Salvelinus fominalis)。

本发明包含以下有益效果：

采用本发明的分子标记，从基因层面对白斑红点鲑和美洲红点鲑进行区分，从而避免了通过肉眼感官检查两种鱼的刺身及熏肉制品存在不准确，容易混淆的问题。

通过本发明的引物进行PCR检测微卫星标记基因型，若检测得到长度为250bp单一片段，则待检测样品来源于白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)；若检测得到长度为252bp和999bp两条目的片段，则待检测样品来源于美洲红点鲑(Salvelinus fominalis)。

本发明所设计的引物对虹鳟的基因组DNA进行PCR扩增，PCR产物扩增片段长度介于300～500bp之间，不与白斑红点鲑和美洲红点鲑基因组DNA所获得PCR扩增产物长度相一致；另外，虹鳟刺身和熏肉制品外观可以凭肉眼感官检查直接区分。因此，虽然该引物针对虹鳟基因组序列设计获得，但是该引物PCR扩增产物对白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品进行鉴别区分并不会与虹鳟刺身及熏肉制品相混淆。

附图说明

图1为利用引物AF346686F和AF346686R对白斑红点鲑和美洲红点鲑的扩增后的电泳图；其中，1-10泳道为美洲红点鲑电泳图，11泳道为DL2000marker，12-21泳道为白斑红点鲑电泳图；

图2为利用引物AF346686F和AF346686R对白斑红点鲑、美洲红点鲑和虹鳟的扩增后的电泳图；其中，1-6泳道为美洲红点鲑电泳图，7-12泳道为白斑红点鲑电泳图，13泳道为DL2000marker，14-19泳道为虹鳟电泳图。

具体实施方式