[发明专利]一种鉴别白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品的分子标记及其应用

权利要求书

1.一种鉴别白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品的分子标记，其特征在于用于PCR扩增分子标记的引物对为AF346686F和AF346686R，具体序列为：

AF346686F:5’-AGT CGT CGG CTT GTC TTC-3’

AF346686R:5’-ACTACG GCT TTC TGG GAT-3’。

2.权利要求1所述的一种鉴别白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品的分子标记的应用，其特征在于它用于鉴别白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)和美洲红点鲑(Salvelinus fominalis)。

3.根据权利要求2所述的一种鉴别白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品的分子标记的应用，其特征在于鉴别白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)和美洲红点鲑(Salvelinus fominalis)的方法如下：采用PCR-LP方法，利用权利要求1的引物对，检测待测样品的微卫星标记基因型，若检测得到长度为250bp单一片段，则待检测样品来源于白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)；若检测得到长度为252bp和999bp两条目的片段，则待检测样品来源于美洲红点鲑(Salvelinus fominalis)，从而完成对白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)和美洲红点鲑(Salvelinus fominalis)的鉴别。

4.根据权利要求2或3所述的一种鉴别白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品的分子标记的应用，其特征在于所述的采用PCR-LP方法，利用权利要求1的引物对，检测待测样品的微卫星标记基因型的具体操作如下：

一、提取待测样品的基因组DNA，备用；

二、以步骤一提取的基因组DNA为模板，利用AF346686F和AF346686R引物，进行PCR反应；

三、待步骤二的PCR反应结束后，收集PCR产物进行电泳检测，观察电泳条带，若电泳得到长度为250bp的单一片段，则表明待检测样品来源于白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)；若电泳得到长度为252bp和999bp两条目的片段，则待检测样品来源于美洲红点鲑(Salvelinus fominalis)，从而完成对白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)和美洲红点鲑(Salvelinus fominalis)的鉴别；

其中，所述的AF346686F和AF346686R引物序列为：

AF346686F:5’-AGT CGT CGG CTT GTC TTC-3’

AF346686R:5’-ACTACG GCT TTC TGG GAT-3’。

5.根据权利要求4所述的一种鉴别白斑红点鲑和美洲红点鲑刺身及熏肉制品的分子标记的应用，其特征在于所述的PCR反应体系为：

PCR扩增条件为：94℃预变性5min；94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共30个循环，再72℃延伸5min，4℃保温。