[发明专利]蜚蠊抗肝纤维化活性提取物的制备及检测方法

权利要求书

1.一种蜚蠊成虫提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

原料处理：将蜚蠊养殖时间在5个月以上的成虫杀死干燥后粉碎；

提取：将所得粉末置于提取罐中，加入醇溶剂进行提取制得滤液；

浓缩：将所得滤液减压浓缩至浸膏无醇味，即得蜚蠊提取物；

脱脂：在油水分离装置中加入所得浸膏和热水，进行搅拌，静置后放出水层，收集滤液并过滤，即得蜚蠊脱脂提取物；

吸附、洗脱：将蜚蠊脱脂提取物经过大孔吸附树脂柱吸附，再用水及不同浓度的醇洗脱，收集60～95％的洗脱液；

制成品：将所得洗脱液过滤、减压浓缩、干燥后粉碎，即得提取物的活性成分；

检测：分别测定提取物的活性成分中总肽、粘多糖、多元醇及游离氨基酸的含量；

所述提取采用冷浸提取法或回流提取法，所述冷浸提取法为将蜚蠊干燥成虫粉碎至10～30目，置浸泡罐中，加3～7倍量体积分数为60～95％的提取溶剂，搅匀，每次浸泡72小时以上，其间每间隔3～6小时搅拌一次，然后将提取液用孔径为200～500目的滤布过滤，收集滤液；所述回流提取法为将蜚蠊干燥成虫粉碎至10～30目，置提取罐中，加3～7倍量体积分数为60～95％的提取溶剂，搅匀，在70～80℃下回流提取2～5小时，提取3次，然后将提取液用孔径为200～500目的滤布过滤，收集滤液；所述过滤先用全棉滤布、棉纶滤布、涤纶滤布、丙纶滤布或尼龙滤布中的一种；

所述脱脂采用在油水分离装置中加入浸膏和浸膏体积量的2～5倍量60～75℃的热水，顺着同一方向缓慢搅拌，并加热至65～75℃，保温0.5小时，静置冷却6～12小时，待油脂分离后放出水层，过滤，收集滤液。

2.根据权利要求1所述的蜚蠊成虫提取物的制备方法，其特征在于：所述原料处理是用50℃～60℃的热水烫死后，在60℃～70℃下烘干。

3.根据权利要求1所述的蜚蠊成虫提取物的制备方法，其特征在于：所述提取步骤中醇溶剂为甲醇、乙醇、乙二醇中的一种或几种与水的混合物，提取2～3次，每次用3～7倍量的溶剂，溶剂浓度为60％～95％，提取方法采用冷浸提取法或回流提取法。

4.根据权利要求1所述的蜚蠊成虫提取物的制备方法，其特征在于：所述吸附、洗脱步骤大孔吸附树脂为颗粒状，不同浓度的醇溶液是指50～95％的乙醇，大孔吸附树脂的用量为脱脂提取液的1～5倍量体积，脱脂液上柱吸附6～12小时后用60～95％的乙醇洗脱，收集洗脱液，过滤。

5.根据权利要求1所述的蜚蠊成虫提取物的制备方法，其特征在于：所述减压浓缩时温度不得超过75℃。

6.一种如权利要求1的制备方法所得到的蜚蠊成虫提取物的检测方法，其特征在于：所述检测方法指采用Folin-酚法测定提取物中的总肽含量，采用苯酚-硫酸法测定提取物中粘多糖的含量，采用高碘酸钾-Nash法测定提取物中多元醇的含量，采用茚三酮法测定提取物中游离氨基酸的含量。