[发明专利]一种重组人II型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白浓度测定方法

权利要求书

1.一种重组人II型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白浓度的测定方法，其特 征在于，待测样品为人血清，待测样品的稀释液为已去除内源性TNFRII的正常 人血清。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述去除内源性TNFRII的 正常人血清是通过利用链霉亲和素偶联的磁珠及生物标记的抗TNFRII单克隆抗 体纯化获得。

3.根据权利要求2所述方法，包括如下步骤：

(1)使用生物素标记抗TNFRII单克隆抗体；

(2)使用链霉亲和素偶联的磁珠捕获步骤(1)所得的生物素标记的抗 TNFRII单克隆抗体；

(3)使用步骤(2)所得的捕获生物素标记抗TNFRII单克隆抗体的链霉亲 和素偶联的磁珠纯化正常人血清，获得去除内源性TNFRII的正常人血清；

(4)使用步骤(3)获得的去除内源性TNFRII的正常人血清作为稀释液稀 释待测样品，测定待测样品中重组人II型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白浓度。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，步骤(4)所述重组人II型肿瘤 坏死因子受体-抗体融合蛋白浓度是通过具有高度特异性的双特异性单克隆抗体 夹心ELISA方法测定。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述方法的标准品、质控样品及 待测样品的稀释液均是权利要求3步骤(3)所获得的去除内源性TNFRII的正常 人血清。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述重组人II型肿瘤坏死因子 受体-抗体融合蛋白浓度测定还使用具备高信噪比的生物素-亲和素信号系统进 行测定。

7.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述抗TNFRII单克隆抗体是 MAB726抗体。

8.根据权利要7所述方法，其特征在于，所述MAB726抗体的重量与链霉亲 和素偶联的磁珠的体积之比为1mg：4ml。

9.一种验证权利要求1-8任一所述方法的验证方法，其特征在于，所述验证 包括标准曲线、准确性、精密度、专属性、选择性、耐受性、冻融稳定性、短期 稳定性和稀释线性的验证，且所述标准曲线、准确性、精密度及耐受性验证是在 同一个实验里使用同样的验证样品进行。