[发明专利]ACE C-结构域选择性抑制肽及其制备方法

权利要求书

1.一种ACE C-结构域选择性抑制肽，用于抑制ACE中C-结构域活性，其特征在于：

所述ACE C-结构域选择性抑制肽的序列为Gly-Tyr以及Ile-Arg-Pro中的任意一种。

2.一种ACE C-结构域选择性抑制肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，以燕麦分离蛋白为原料，配制质量浓度为5％-10％燕麦分离蛋白溶液，并调节溶液的pH值为8.0～8.5，置于酶膜反应器的反应罐中，温度控制在40℃～50℃，按酶/底物(质量比)为1.0％～3.0％在蛋白溶液中加入蛋白酶，开启循环泵，开始酶膜反应，收集膜透过液，得到燕麦蛋白水解产物；

步骤2，将步骤1中的所述燕麦蛋白水解产物干燥后，溶解于碳酸氢铵溶液中，在亲和色谱柱上进行亲和吸附，至滤出物在214nm处出现最大吸收并趋于平稳为止；

步骤3，对步骤2中的所述亲和色谱柱进行洗脱，得到目标肽溶液；

步骤4，对步骤3中的所述目标肽溶液进行浓缩、分离纯化、序列解析以及抑制活性验证，得到所述ACE C-结构域选择性抑制肽。

3.根据权利要求2所述的ACE C-结构域选择性抑制肽的制备方法，其特征在于：

其中，所述酶膜反应器中的膜为超滤膜以及纳滤膜中的任意一种，所述滤膜的截留分子量为6000Da～10000Da，过滤压力为0.8～1.0Mpa。

4.根据权利要求2所述的ACE C-结构域选择性抑制肽的制备方法，其特征在于：

其中，所述酶膜反应过程中，利用0.1mol/L的NaOH溶液进行滴定，控制酶解液pH为8.0～8.5。

5.根据权利要求2所述的ACE C-结构域选择性抑制肽的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤：

所述酶膜反应结束后，对得到的所述燕麦蛋白水解产物进行喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风温度和出风温度分别控制在170℃～190℃和90℃～110℃。

6.根据权利要求2所述的ACE C-结构域选择性抑制肽的制备方法，其特征在于：

其中，所述酶膜反应的反应时间为3-4小时。

7.根据权利要求2所述的ACE C-结构域选择性抑制肽的制备方法，其特征在于：

其中，所述蛋白酶为胰蛋白酶。

8.根据权利要求2所述的ACE C-结构域选择性抑制肽的制备方法，其特征在于：

其中，所述亲和色谱柱选用tACEΔ36-g13亲和色谱柱。

9.根据权利要求2所述的ACE C-结构域选择性抑制肽的制备方法，其特征在于：

其中，采用RP-HPLC技术，对所述目标肽溶液进行分离纯化，获得两种肽组分。