[发明专利]藏药坐珠达西的3种成分检测及其化学代谢物轮廓分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种坐珠达西的质量检测方法。

背景技术

藏药坐珠达西，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准.藏药》，标准编号：WS3-BC-0315-95，由寒水石、木香、丁香、船形乌头、西红花、肉豆蔻、草果、熊胆、牛黄、红花、荜茇、甘青青兰、马钱子、麝香等35味药物组成，具有疏肝、健胃、清热、愈溃疡、消肿等功效，常用于“木布”病迁延不愈、胃脘嘈杂、消化不良、浮肿、水肿等。该制剂标准分为两个理化鉴别、船形乌头薄层鉴别以及丸剂的常规检查。为提高标准，马肖等进行了熊胆、牛黄、木香、丁香的薄层鉴别，马钱子的HPLC定性鉴别，及西红花苷Ⅰ的含量测定。专利申请号：201310496290.9，发明名称：一种药物组合物坐珠达西的检测方法，该发明测定西红花的含量，能对毒性药材马钱子进行含量检测；还对荜茇、牛黄和没食子酸进行薄层色谱鉴别，能更全面准确地对药物组合物坐珠达西进行检测。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种新的坐珠达西的质量检测方法。

本发明提供了一种坐珠达西的质量检测方法，它是采用HPLC方法同时检测槲皮素、胡椒碱、齐墩果酸，分别代表黄酮、生物碱、有机酸三大类成分，其色谱条件为：

采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相乙腈-0.02％磷酸溶液，梯度洗脱，流速1mL·min^-1，槲皮素检测波长为255nm,胡椒碱检测波长为340nm，齐墩果酸的检测波长为210nm；

流动相乙腈(A)-0.02％磷酸溶液(B),梯度洗脱条件为：0～6min，36％A～42％A；6～12min，42％A～52％A；12～22min，52％A～65％A；22～30min，65％A～87％A；30～40min，87％A～92％A。

具体地，它包括如下步骤：

a、供试品溶液制备；

b、对照品溶液制备；

c、按权利要求1所述的色谱条件检测。

其中，所述的供试品的制备方法为：取坐珠达西粉末，加入定量的有机溶剂，超声提取。

其中，所述的供试品的制备方法为：坐珠达西粉末1.0g，所述的有机溶剂为甲醇，甲醇的用量为15-25ml，超声时间为20-40min，超声温度为20-80℃。

其中，所述甲醇用量为15ml；超声时间30min；超声温度64℃。

其中，所述的对照品溶液的制备方法为：取槲皮素、胡椒碱、齐墩果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.1272，0.0426，0.502mg的溶液，即得各对照品溶液。

本发明通过对坐珠达西中槲皮素、胡椒碱、齐墩果酸3种成分(代表黄酮、生物碱、有机酸三大类成分)的含量测定方法。其中槲皮素为丁香、木香、草果、红花等活性成分，有舒张胃肠平滑肌的作用，抑制胃癌细胞的恶性增殖等；胡椒碱为方中荜茇的主要成分之一，具有广泛的抗胃肠道疾病作用；齐墩果酸为方中甘青青兰、丁香中的主要成分之一，具有清热祛湿,舒肝和胃之功效。同时利用HPLC法同时测定3个厂家8批24个样品中的槲皮素、胡椒碱、齐墩果酸3个成分的含量，并进行化学代谢物轮廓分析。本发明质量检测方法中供试品制备条件稳定可行，HPLC含量测定方法稳定可靠，可用于藏药坐珠达西的含量测定和质量控制。

附图说明

图1本发明坐珠达西供试品及标准品图谱(其中，A1为检测波长255nm供试品图谱；A2为检测波长255nm槲皮素标准品图谱；B1为检测波长340nm供试品图谱；B2为检测波长340nm胡椒碱标准品图谱；C1为检测波长210nm供试品图谱；C2为检测波长210nm齐墩果酸标准品图谱)

图2样品的PCA图

图3坐珠达西样品PCA打分图的HCA分析柱状图

图4坐珠达西样品的PCA荷载图(其中，峰-10.槲皮素，峰-40.胡椒碱，峰-71.齐墩果酸)

具体实施方式

实施例1本发明坐珠达西质量检测方法

1材料

Waters 2695/2996型高效液相色谱仪，2996PDA检测器，Empower化学工作站；KQ5200E型超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)；METILER AE240S型电子天平(梅特勒-托利上海有限公司)。